大鼠磷酸化母親DDP同源物3(P-Smad3)elisa試劑盒
商品屬性：
英文名稱 | RatP-Smad3 elisa kit | 靈敏度 | 0.15625ng/ml |
檢測(cè)范圍 | 0.3125ng/ml-20ng/ml | 貨號(hào) | PR8007 |
核心參數(shù)：
檢測(cè)原理：磷酸化位點(diǎn)特異性雙抗體夾心法，捕獲 P-Smad3 蛋白，免疫顯色定量。
種屬反應(yīng)性：僅大鼠特異反應(yīng)。
樣本類型：血清、組織勻漿、細(xì)胞核蛋白、細(xì)胞裂解液。
檢測(cè)時(shí)間：3.5–4h。
保存條件：2–8℃避光冷藏。
特異性：不與總 Smad3 及其他 Smad 家族蛋白交叉反應(yīng)。
板內(nèi) / 板間變異系數(shù)：板內(nèi) CV＜8%，板間 CV＜10%。
夾心法數(shù)據(jù)：
| 校準(zhǔn)品濃度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.713 | 1.568 | 0.837 | 0.495 | 0.292 | 0.156 | 0.092 | 0.042 |
| 校正OD值 | 2.672 | 1.526 | 0.796 | 0.453 | 0.250 | 0.115 | 0.050 | 0.000
|
夾心法標(biāo)曲：
產(chǎn)品定義：
用于定量檢測(cè)大鼠樣本中磷酸化母親DDP同源物3（P-Smad3）含量的ELISA試劑盒。Smad3是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）信號(hào)通路的關(guān)鍵下游分子，當(dāng)TGF-β與其受體結(jié)合后，Smad3被磷酸化激活，形成復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞核，調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)，參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡、纖維化等多種生理病理過程。P-Smad3水平升高與纖維化疾病、腫瘤、自身免疫性疾病等相關(guān)，試劑盒可用于研究TGF-β信號(hào)通路的功能及相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)制。
操作步驟:
?試劑準(zhǔn)備?：所有試劑恢復(fù)至室溫（18–25℃），洗滌液如有結(jié)晶需加熱溶解；
?標(biāo)準(zhǔn)品配制?：將凍干標(biāo)準(zhǔn)品用1mL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液溶解，得2000 pg/mL原液，再倍比稀釋成7個(gè)濃度梯度，另設(shè)空白孔（僅稀釋液）；
?加樣?：每孔加入50μL樣本或標(biāo)準(zhǔn)品，37℃孵育30–60分鐘；
?洗板?：棄去孔內(nèi)液體，用1×洗滌液洗板5次，拍干；
?加酶標(biāo)抗體?：每孔加入100μL檢測(cè)抗體-HRP，37℃孵育1小時(shí)；
?洗板?：同上；
?顯色?：每孔加入50μL底物A + 50μL底物B，37℃避光孵育10–30分鐘；
?終止?：每孔加入50μL終止液，顏色由藍(lán)變黃；
?讀數(shù)?：在450 nm波長(zhǎng)下用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
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