大鼠熱休克同源蛋白70(Hsc70;HSPA8)elisa試劑盒
商品屬性:

英文名稱 | RatHsc70;HSPA8 elisa kit | 靈敏度 | 0.15625ng/mL |
檢測(cè)范圍 | 0.3125ng/mL-20ng/mL | 貨號(hào) | PR9197 |
核心參數(shù):

檢測(cè)原理:雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
種屬反應(yīng)性:僅大鼠 Hsc70/HSPA8 特異識(shí)別
樣本類型:血清、組織勻漿、細(xì)胞上清
檢測(cè)時(shí)間:2.5–3 小時(shí)
保存條件:2–8℃冷藏,試劑密封存放
特異性:專一識(shí)別熱休克蛋白同源物,無明顯交叉反應(yīng)
板內(nèi) / 板間變異系數(shù):板內(nèi)<8%,板間<10%
夾心法數(shù)據(jù):

| 校準(zhǔn)品濃度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.713 | 1.568 | 0.837 | 0.495 | 0.292 | 0.156 | 0.092 | 0.042 |
| 校正OD值 | 2.672 | 1.526 | 0.796 | 0.453 | 0.250 | 0.115 | 0.050 | 0.000
|
夾心法標(biāo)曲:


產(chǎn)品定義:

Hsc70是組成型表達(dá)的熱休克蛋白70家族成員,作為分子伴侶參與蛋白質(zhì)折疊、轉(zhuǎn)運(yùn)和降解,維持細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài),同時(shí)參與抗原提呈、細(xì)胞凋亡調(diào)控和應(yīng)激反應(yīng),其表達(dá)異常與神經(jīng)退行性疾病、腫瘤耐藥相關(guān)。
操作步驟:

?試劑準(zhǔn)備?:所有試劑恢復(fù)至室溫(18–25℃),洗滌液如有結(jié)晶需加熱溶解;
?標(biāo)準(zhǔn)品配制?:將凍干標(biāo)準(zhǔn)品用1mL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液溶解,得2000 pg/mL原液,再倍比稀釋成7個(gè)濃度梯度,另設(shè)空白孔(僅稀釋液);
?加樣?:每孔加入50μL樣本或標(biāo)準(zhǔn)品,37℃孵育30–60分鐘;
?洗板?:棄去孔內(nèi)液體,用1×洗滌液洗板5次,拍干;
?加酶標(biāo)抗體?:每孔加入100μL檢測(cè)抗體-HRP,37℃孵育1小時(shí);
?洗板?:同上;
?顯色?:每孔加入50μL底物A + 50μL底物B,37℃避光孵育10–30分鐘;
?終止?:每孔加入50μL終止液,顏色由藍(lán)變黃;
?讀數(shù)?:在450 nm波長(zhǎng)下用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
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