Recombinant Human PPM1G圖片

商品介紹：

別稱：MGC1675, MGC2870, OTTHUMP00000123426, PP2C, PP2C gamma, PP2C-gamma, PP2CG, PP2Cgamma, PPM1G, PPM1G_HUMAN, PPP2CG, Protein phosphatase 1C, Protein phosphatase 1G, Protein phosphatase 2 catalytic subunit gamma isoform, Protein phosphatase 2C gamma isoform, Protein phosphatase 2C isoform gamma, Protein phosphatase magnesium dependent 1 gamma, Protein phosphatase magnesium-dependent 1 gamma

標簽：N-terminal His Tag

種屬：Human

宿主：E.Coli

表達區(qū)間：1-546

分子量：60 kDa

                 Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

應用：Western Blot, ELISA

性狀：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

純度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存儲:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

商品概述：

該蛋白屬于 PP2C（蛋白磷酸酶 2C）家族，是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶，廣泛表達于人體組織中，在睪丸、骨骼肌和心臟中含量尤為豐富。其核心功能是作為細胞應激反應通路的負調(diào)控因子，通過去磷酸化作用調(diào)節(jié)多種信號轉(zhuǎn)導級聯(lián)反應；特別地，PPM1G 在 RNA 剪接過程中發(fā)揮關鍵作用，負責剪接因子的去磷酸化，這對功能性剪接體的形成至關重要，同時也參與細胞周期進程的調(diào)控。重組形式的 PPM1G 通常帶有 His 標簽，主要用于腫瘤生物學、RNA 代謝及細胞應激反應等領域的研究。

重組蛋白的制備流程：

重組蛋白的制備流程主要包括以下幾個關鍵步驟：

1.基因獲?。簭纳矬w中提取目的基因，可通過PCR技術擴增特定DNA片段，也可以人工合成基因序列，確保所獲取的基因能編碼目標重組蛋白。

2.載體構建：將獲取的目的基因與合適的載體連接，常見載體有質(zhì)粒、噬菌體等。載體需具備復制原點、篩選標記等元件，使目的基因能在宿主細胞中穩(wěn)定復制和表達。

3.宿主細胞轉(zhuǎn)化：把構建好的重組載體導入宿主細胞，如大腸桿菌、酵母細胞或哺乳動物細胞等。轉(zhuǎn)化方法有化學轉(zhuǎn)化法、電穿孔法等。

4.篩選與鑒定：運用抗生素篩選、PCR鑒定、測序等方法，挑選出含有重組載體的陽性克隆細胞。

5.蛋白表達：優(yōu)化培養(yǎng)條件，誘導陽性克隆細胞表達重組蛋白。根據(jù)宿主細胞類型和蛋白特性，調(diào)整溫度、誘導劑濃度等參數(shù)。

6.蛋白純化：采用親和層析、離子交換層析、凝膠過濾等方法，從細胞裂解液或培養(yǎng)液中分離純化重組蛋白。

7.質(zhì)量檢測：對純化后的重組蛋白進行純度、活性、分子量等檢測，確保其符合質(zhì)量要求。

公司正在出售的產(chǎn)品：

收到產(chǎn)品后的處理：

離心收集：重組蛋白通常以凍干粉形式提供。在運輸過程中，粉末可能會粘附在管壁或管蓋上。因此，在開蓋前，務必先進行短暫離心（例如 10,000-12,000 rpm，30秒），將凍干粉收集于管底。

復溶操作

選擇合適的溶劑：

仔細閱讀產(chǎn)品說明書，嚴格按照推薦的溶劑和濃度進行復溶。

通常使用無菌的 PBS 緩沖液或低鹽緩沖液（如 10 mM Tris, pH 8.0）。

切勿使用純水，因為缺乏緩沖能力和合適的離子強度可能導致蛋白沉淀或失活。

輕柔混勻：

向凍干粉中加入推薦體積的溶劑，用移液器槍頭輕輕吹打或緩慢上下顛倒混勻。

絕對禁止渦旋震蕩，因為劇烈的剪切力會破壞蛋白質(zhì)的空間結構，導致其變性失活。

如果蛋白難以溶解，可將其置于 4℃ 靜置 2 小時以上或在水平搖床上低速搖晃。

達到推薦濃度：

初次復溶時，建議將蛋白濃度配制在說明書推薦的范圍內(nèi)（通常不低于 100 μg/mL），這有助于維持蛋白的穩(wěn)定性。