人E6AP；p53泛素化(E6AP；p53)elisa試劑盒
商品屬性：
英文名稱 | human E6AP；p53 elisa kit | 靈敏度 | 0.15625ng/ml |
檢測范圍 | 0.3125ng/ml-20ng/ml | 貨號 | PH25520 |
核心參數(shù)：
檢測原理：雙抗體夾心法，特異性識別 E6AP-p53 泛素化復合物，免疫結合顯色定量。
種屬反應性：僅人源復合物特異性反應。
樣本類型：細胞裂解液、腫瘤組織勻漿、核蛋白樣本。
檢測時間：3.5–4.5h。
保存條件：2–8℃避光冷藏。
特異性：不單獨識別游離 E6AP 或 p53，特異性識別泛素化復合物。
板內 / 板間變異系數(shù)：板內 CV＜8%，板間 CV＜10%。
夾心法數(shù)據(jù)：
| 校準品濃度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.713 | 1.568 | 0.837 | 0.495 | 0.292 | 0.156 | 0.092 | 0.042 |
| 校正OD值 | 2.672 | 1.526 | 0.796 | 0.453 | 0.250 | 0.115 | 0.050 | 0.000
|
夾心法標曲：
產品定義：
E6AP即E3泛素連接酶，能與HPV病毒E6蛋白結合，介導p53蛋白的泛素化降解，從而抑制p53的腫瘤抑制功能，是HPV誘導細胞癌變的重要機制之一；p53是重要的腫瘤抑制蛋白，參與調控細胞周期、凋亡、DNA損傷修復等過程，其功能失活與多種腫瘤相關。
操作步驟:
?試劑準備?：所有試劑恢復至室溫（18–25℃），洗滌液如有結晶需加熱溶解；
?標準品配制?：將凍干標準品用1mL標準品稀釋液溶解，得2000 pg/mL原液，再倍比稀釋成7個濃度梯度，另設空白孔（僅稀釋液）；
?加樣?：每孔加入50μL樣本或標準品，37℃孵育30–60分鐘；
?洗板?：棄去孔內液體，用1×洗滌液洗板5次，拍干；
?加酶標抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育1小時；
?洗板?：同上；
?顯色?：每孔加入50μL底物A + 50μL底物B，37℃避光孵育10–30分鐘；
?終止?：每孔加入50μL終止液，顏色由藍變黃；
?讀數(shù)?：在450 nm波長下用酶標儀測定OD值，根據(jù)標準曲線計算樣本濃度。
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關鍵字： 人E6AP；p53泛素化;E6AP；p53;elisa試劑盒;
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