用于定量檢測人樣本中β-肌動蛋白（β-actin）的ELISA試劑盒。β-actin是一種高度保守的細胞骨架蛋白，參與維持細胞形態(tài)、細胞運動和細胞分裂等過程，其表達水平相對穩(wěn)定，常被用作內(nèi)參蛋白，用于校正樣本間的差異和標準化蛋白表達量。試劑盒通常采用雙抗體夾心法，利用特異性抗體識別樣本中的β-actin，通過酶催化底物顯色，根據(jù)標準曲線計算樣本中目標蛋白的濃度，可用于分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)研究。
產(chǎn)品名稱 | 人β肌動蛋白(β-actin )elisa試劑盒 | 靈敏度 | 0.15625ng/ml |
英文名稱 | human β-actin elisa kit | 貨號 | PH19316 |
檢測范圍 | 0.3125ng/ml-20ng/ml | 品牌 | 派瑞曼 |
夾心法數(shù)據(jù)：
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗數(shù)據(jù)建立標準曲線。
| 校準品濃度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.713 | 1.568 | 0.837 | 0.495 | 0.292 | 0.156 | 0.092 | 0.042 |
| 校正OD值 | 2.672 | 1.526 | 0.796 | 0.453 | 0.250 | 0.115 | 0.050 | 0.000
|
夾心法標曲：
核心參數(shù)：
檢測原理：雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法，靶向結(jié)合 β-actin 內(nèi)參蛋白，顯色定量表達量。
種屬反應(yīng)性：特異識別人源 β-actin，與其他物種 actin 同源蛋白低度交叉，主要適配人樣本。
樣本類型：人血清、細胞裂解液、組織勻漿、各類生物樣本。
檢測時間：2.5～3h。
保存條件：2～8℃常規(guī)冷藏密封保存。
特異性：與 α-actin、γ-actin 無明顯交叉反應(yīng)。
板內(nèi) / 板間變異系數(shù)：板內(nèi)＜8%，板間＜10%。
操作步驟:
?試劑準備?：所有試劑恢復(fù)至室溫（18–25℃），洗滌液如有結(jié)晶需加熱溶解；
?標準品配制?：將凍干標準品用1mL標準品稀釋液溶解，得2000 pg/mL原液，再倍比稀釋成7個濃度梯度，另設(shè)空白孔（僅稀釋液）；
?加樣?：每孔加入50μL樣本或標準品，37℃孵育30–60分鐘；
?洗板?：棄去孔內(nèi)液體，用1×洗滌液洗板5次，拍干；
?加酶標抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育1小時；
?洗板?：同上；
?顯色?：每孔加入50μL底物A + 50μL底物B，37℃避光孵育10–30分鐘；
?終止?：每孔加入50μL終止液，顏色由藍變黃；
?讀數(shù)?：在450 nm波長下用酶標儀測定OD值，根據(jù)標準曲線計算樣本濃度。
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關(guān)鍵字： 人β肌動蛋白;β-actin ;elisa試劑盒;
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