人胃黏膜上皮細(xì)胞是構(gòu)成胃黏膜表層的單層柱狀上皮細(xì)胞，主要功能是分泌黏液，形成胃黏液-碳酸氫鹽屏障，抵御胃酸和胃蛋白酶對(duì)胃壁的侵蝕，同時(shí)參與胃黏膜的更新和修復(fù)。該細(xì)胞對(duì)胃內(nèi)酸性環(huán)境有極強(qiáng)的耐受力，是胃部抵御外界刺激的第一道防線，常用于胃炎、胃潰瘍等胃部疾病的病理機(jī)制研究。
產(chǎn)品名稱 人胃黏膜上皮細(xì)胞

英文名稱：Human Gastric Mucosal Epithelial Cells

貨號(hào)：YS-01X7189

組織來(lái)源 胃組織

種屬 人

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

方法簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)室分離的人胃黏膜上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室分離的人胃黏膜上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%胰蛋白酶人胃黏膜上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

人胃黏膜上皮細(xì)胞分離自胃黏膜組織；胃黏膜柔軟，活體呈橘紅色。胃空虛時(shí)形成許多皺襞，充盈時(shí)變平坦。幽門處的黏膜形成環(huán)形皺襞，突向腔內(nèi)稱幽門瓣。胃黏膜可分為三層，即上皮層(單層柱狀上皮)、固有層(由結(jié)締組織構(gòu)成、含有大量的胃腺)和黏膜肌層(為薄層平滑肌、排列成內(nèi)環(huán)外縱)。胃黏膜上皮細(xì)胞源自胃黏膜的上皮層，細(xì)胞為單層柱狀上皮，排列整齊，能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面，防止胃酸和胃蛋白酶對(duì)胃黏膜的損害。體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細(xì)胞為研究細(xì)胞功能及致病因子、藥物、激素對(duì)細(xì)胞的損傷、保護(hù)和功能調(diào)控提供了簡(jiǎn)單而優(yōu)越的模型。

細(xì)胞組成：?jiǎn)螌訕O性上皮細(xì)胞，主要為黏液細(xì)胞、壁細(xì)胞、主細(xì)胞混合上皮群

形態(tài)結(jié)構(gòu)：多邊形鋪路石樣、緊密連接，單層貼壁生長(zhǎng)，胞質(zhì)透亮

分子標(biāo)記：MUC5AC、Claudin-1、E-cadherin、Gastrin

功能特性：分泌胃酸、胃蛋白酶原、黏液屏障；參與胃黏膜屏障維持、消化吸收、損傷修復(fù)

形成胃黏膜屏障，抵御胃酸、胃蛋白酶侵蝕與機(jī)械損傷

分泌黏液、碳酸氫根離子，維持胃部酸堿穩(wěn)態(tài)

參與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)初步吸收與局部免疫防御應(yīng)答

調(diào)控胃黏膜損傷修復(fù)、細(xì)胞更新與穩(wěn)態(tài)維持

1.無(wú)菌環(huán)境下取出組織，用預(yù)冷PBS快速?zèng)_洗2次去除表面血污，直接剪至1mm3左右小塊

2.將組織塊加入混合消化液，37℃恒溫振蕩消化20-25分鐘，期間每隔10分鐘輕輕搖晃一次

3.消化結(jié)束后，直接加入預(yù)熱的完全培養(yǎng)基終止消化，用200目細(xì)胞篩一次性過(guò)濾

4.無(wú)需離心，直接將濾液接種至預(yù)熱的包被培養(yǎng)瓶中，放入37℃、5%CO?培養(yǎng)箱

5.24小時(shí)后首次半換液，僅更換一半培養(yǎng)基，避免剛貼壁的細(xì)胞脫落

6.此后每2-3天換液一次，待細(xì)胞融合度達(dá)到80%左右時(shí)，直接用0.25%胰蛋白酶室溫消化1-2分鐘，加入培養(yǎng)基終止后輕輕吹打，按1:2比例直接傳代，無(wú)需離心收集細(xì)胞