人真皮成纖維細胞是真皮組織的主要細胞成分，參與皮膚結構維持、損傷修復和膠原蛋白合成。可分泌膠原蛋白、彈性纖維等細胞外基質，維持皮膚的韌性和彈性，在皮膚損傷時大量增殖，促進傷口愈合，過度增殖會導致瘢痕形成。常用于研究皮膚生理功能、創(chuàng)傷修復機制、瘢痕防治及皮膚醫(yī)學藥物研發(fā)。
產品名稱 人真皮成纖維細胞

英文名稱：Human Dermal Fibroblast Cells

貨號：YS-01X7340

組織來源 皮膚組織

種屬 人

產品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

方法簡介：實驗室分離的人真皮成纖維細胞采用先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶 - 膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：實驗室分離的人真皮成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：包被條件

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內狀態(tài)最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶人真皮成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

人真皮成纖維細胞分離自皮膚組織內的真皮層；皮膚

組織來源包括頭部、臉部、手、腳、腿、背部、腹部、包皮等體表部位皮膚，可依據需求選用；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質內。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網狀層。真皮的結構組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構造和維持組織的正常形態(tài)，合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

細胞組成：皮膚真皮層結締組織成纖維細胞

形態(tài)結構：梭形、扁平多角形，網狀貼壁生長

分子標記：Vimentin、Collagen Ⅰ/Ⅲ、Fibronectin

功能特性：皮膚膠原合成、創(chuàng)面修復、真皮基質更新、抗衰老代謝

合成膠原蛋白、彈性蛋白，維持皮膚真皮層結構與彈性

參與皮膚創(chuàng)傷愈合、肉芽組織生成與瘢痕修復

分泌細胞因子，調節(jié)皮膚局部炎癥與微環(huán)境穩(wěn)態(tài)

延緩皮膚老化，調控真皮組織代謝與更新

1.無菌取出組織，預冷 PBS 反復沖洗，去除血跡、氣管及雜質組織。

2.將組織剪碎至 1mm3 細小組織塊，PBS 反復漂洗，去除漂浮雜質與死細胞。

3.加入混合消化液（胰酶 + 膠原酶），37℃水浴消化 20~30min，間斷輕柔吹打；血清培養(yǎng)基加入終止消化。

4.細胞懸液過 100μm 濾網，收集濾液，300g 離心 5min，棄上清，PBS 重懸洗滌一次。

5.完全培養(yǎng)基重懸細胞，調整合適密度接種于培養(yǎng)皿；置于 37℃、5% CO?培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。

6.培養(yǎng) 24h 后首次換液，利用差速貼壁特性：成纖維細胞貼壁快，去除未貼壁上皮等雜細胞；之后每 2~3 天換液一次。