人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞是構(gòu)成真皮微血管管壁的主要細(xì)胞，參與皮膚物質(zhì)交換、氧氣供應(yīng)和微循環(huán)調(diào)節(jié)?？煞置谘芑钚晕镔|(zhì)，調(diào)節(jié)微血管舒張和收縮，維持皮膚血流灌注，同時(shí)參與皮膚損傷修復(fù)和血管生成。其功能異常與皮膚缺血性疾病、糖尿病性皮膚病等相關(guān)，常用于研究皮膚微循環(huán)、皮膚疾病病理及創(chuàng)面修復(fù)藥物研發(fā)。
產(chǎn)品名稱 人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞
英文名稱：Human Dermal Microvascular Endothelial Cells
貨號(hào)：YS-01X7329
組織來(lái)源 皮膚組織
種屬 人
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)室分離的人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、最后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室分離的人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：包被條件PLL（0.1mg/ml）或明膠（0.1%）
培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰蛋白酶人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。微血管內(nèi)皮細(xì)胞(MEC)在炎癥反應(yīng)、腫瘤生長(zhǎng)、創(chuàng)面愈合過(guò)程中起著非常重要的作用。在創(chuàng)面愈合研究領(lǐng)域，由于表皮細(xì)胞、真皮成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的成熟，人們對(duì)這兩種細(xì)胞早已進(jìn)行了大量深入的研究。與之相比，對(duì)參與創(chuàng)面愈合過(guò)程的另一種主要細(xì)胞——真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞，則因其體外分離培養(yǎng)技術(shù)的困難而使相關(guān)的研究受限。
細(xì)胞組成：皮膚真皮毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞
形態(tài)結(jié)構(gòu)：鵝卵石樣多邊形，單層緊密排列
分子標(biāo)記：CD31、vWF、eNOS、Tie2
功能特性：皮膚微循環(huán)物質(zhì)交換、血管生成、皮膚屏障血流調(diào)節(jié)
構(gòu)建皮膚微循環(huán)屏障，完成皮膚組織物質(zhì)交換與營(yíng)養(yǎng)供給
調(diào)節(jié)皮膚微血管收縮舒張，調(diào)控皮膚血流與溫度穩(wěn)態(tài)
參與皮膚炎癥反應(yīng)、血管新生及創(chuàng)面血管化修復(fù)
維持皮膚微循環(huán)穩(wěn)定，抵御外界刺激引發(fā)的血管損傷
1.取材：新鮮組織（動(dòng)物 / 臨床），預(yù)冷 PBS 沖洗，去除血污、脂肪、包膜。
2.修剪：剪成1 mm3小塊，PBS 洗 3–5 次至澄清。
3.消化：
加 3–5 倍體積0.25% 胰酶，37℃孵育10–20 min，每 5 min 輕搖。
纖維組織換膠原酶，37℃消化 30–60 min。
4.終止：加等體積含血清培養(yǎng)基中和胰酶。
5.過(guò)濾：100 μm 篩過(guò)濾，棄未消化塊。
6.離心：300–400 g × 5 min，棄上清；PBS 重懸洗滌 1 次。
7.接種：完全培養(yǎng)基重懸，計(jì)數(shù)；按1×10?–5×10? cells/cm2接種。
8.培養(yǎng)：37℃、5% CO?；24 h 內(nèi)不動(dòng)，48–72 h 首次換液。
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關(guān)鍵字： 人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞;皮膚組織;內(nèi)皮細(xì)胞樣;
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