人主動脈外膜成纖維細胞位于主動脈外膜層，參與主動脈壁結(jié)構(gòu)維持、血管損傷修復(fù)和血管重構(gòu)。可分泌膠原蛋白、彈性纖維等細胞外基質(zhì)，維持主動脈壁的韌性和彈性，在血管損傷時可遷移至內(nèi)膜和中膜，促進血管狹窄和粥樣硬化形成。常用于研究主動脈重構(gòu)機制、動脈粥樣硬化病理及心血管疾病藥物研發(fā)。
產(chǎn)品名稱 人主動脈外膜成纖維細胞

英文名稱：Human Aortic Adventitial Fibroblast Cells

貨號：YS-01X8314

組織來源 主動脈組織

種屬 人

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

方法簡介：實驗室分離的人主動脈外膜成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：實驗室分離的人主動脈外膜成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：包被條件

培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%胰蛋白酶人主動脈外膜成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

人主動脈外膜成纖維細胞分離自主動脈血管外膜組織；血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成，其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細胞以成纖維細胞為主，當血管受損傷時，成纖維細胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處，有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細胞是血管外膜的主要組成細胞之一，其主要生理功能合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

細胞組成：主動脈外膜結(jié)締組織成纖維細胞

形態(tài)結(jié)構(gòu)：長梭形，多突起，疏松網(wǎng)狀分布

分子標記：Vimentin、Collagen I、PDGFR-β

功能特性：外膜基質(zhì)合成、血管損傷修復(fù)、炎癥細胞招募

支撐主動脈外膜結(jié)構(gòu)，維持血管壁整體機械穩(wěn)定性

合成細胞外基質(zhì)，參與血管外膜修復(fù)與纖維化進程

感知血管損傷與炎癥信號，啟動局部修復(fù)應(yīng)答

調(diào)控血管外膜炎癥、鈣化，參與慢性大血管病變

1.選取新鮮組織，70%乙醇消毒后無菌條件下取出顱蓋骨，去除血管及結(jié)締組織，剪成1×1mm的小塊

2.加入2ml 0.25%胰蛋白酶，37℃水浴消化30min，離心去酶，棄上清

3.加入2ml Ⅱ型膠原酶，37℃水浴繼續(xù)消化1h，期間每隔15分鐘輕輕搖晃一次

4.消化結(jié)束后加入預(yù)熱的完全培養(yǎng)基終止消化，用200目濾網(wǎng)過濾，濾液1500×g離心5分鐘

5.棄上清，用預(yù)熱的完全培養(yǎng)基重懸細胞沉淀，接種至提前包被好的培養(yǎng)瓶

6.將培養(yǎng)瓶置于37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)