商品屬性
產品名稱 | 人視網膜色素上皮細胞 | 貨號 | YS-01X7409 |
英文名稱 | Human Retinal Pigment Epithelial Cells | 生長特性 | 貼壁 |
產品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 | 組織來源 | 視網膜組織 |
細胞簡介
人視網膜色素上皮細胞分離自視網膜組織；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節(jié)細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。第一神經元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細胞，約有10到數百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面，經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力最強。視網膜色素上皮(RPE)位于脈絡膜和光感受器細胞外節(jié)之間，是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質和代謝終產物轉運通道；主要是由單層色素上皮細胞所構成，排列十分規(guī)則。視網膜色素上皮參與視黃醇循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。細胞呈多角形，細胞分為三部分，即頂部、體部和基底部。視網膜色素上皮細胞無再生能力，細胞死亡后不被替換，而是鄰近的細胞向側面滑動，以填補死亡細胞遺留下來的空間。視網膜色素上皮位于脈絡膜和光感受器細胞外節(jié)之間，是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質和代謝終產物轉運通道。視網膜色素上皮參與視黃醇循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。
產品信息
產品名稱 人視網膜色素上皮細胞
組織來源 視網膜組織
種屬 人
產品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡介：實驗室分離的人視網膜色素上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：實驗室分離的人視網膜色素上皮細胞經S-100免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：Accutase消化液：或0.25%胰蛋白酶人視網膜色素上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
生物特征
1. 細胞組成：視網膜外層單層色素上皮屏障細胞
2. 形態(tài)結構：六角形鋪路石排列，胞含黑色素顆粒
3. 分子標記：RPE65、Bestrophin、CRALBP
4. 功能特性：感光細胞代謝支持、光吸收、血 - 視網膜外屏障
核心功能
吞噬降解感光細胞外節(jié)，維持感光細胞正常功能
構成血 - 視網膜屏障，調控營養(yǎng)輸送與廢物代謝
吸收散射光線、抗氧化，保護視網膜感光組織
參與視網膜退變、黃斑病變、眼底疾病病理進程
原代細胞傳代操作指南
傳代時機判斷
當細胞融合度達到70%-80%時進行傳代，此時細胞活力最佳，避免過度融合導致接觸抑制
若細胞生長緩慢或形態(tài)變差，可提前傳代調整密度
具體操作步驟
預處理：提前預熱培養(yǎng)基、胰蛋白酶和PBS，準備好無菌離心管、移液管等耗材
消化細胞：吸棄舊培養(yǎng)基，用PBS輕輕沖洗細胞表面1-2次，去除殘留血清；加入適量胰蛋白酶（覆蓋細胞表面即可），37℃孵育1-3分鐘，期間在顯微鏡下觀察，待細胞邊緣收縮、變圓且開始脫落時終止消化
終止消化與收集：加入等量含血清的培養(yǎng)基中和胰蛋白酶，用移液管輕輕吹打培養(yǎng)瓶壁，使細胞完全脫落形成細胞懸液；將細胞懸液轉移至離心管，以1000rpm離心5分鐘
重懸與接種：棄上清，用預熱的完全培養(yǎng)基重懸細胞，按1:2-1:3的比例接種至新的培養(yǎng)瓶，補充培養(yǎng)基后輕輕搖勻，放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)
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關鍵字： 人視網膜色素上皮細胞;視網膜組織;上皮細胞樣;
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