小鼠冠狀動脈平滑肌細胞是構(gòu)成冠狀動脈管壁中膜的主要細胞,其收縮和舒張功能直接影響冠狀動脈的管徑和血液供應。該細胞的功能受到神經(jīng)、體液等多種因素的調(diào)節(jié),當體內(nèi)兒茶酚胺等縮血管物質(zhì)增加時,平滑肌細胞收縮,冠狀動脈管徑變小,血液供應減少;而當一氧化氮等舒血管物質(zhì)增加時,平滑肌細胞舒張,冠狀動脈管徑變大,血液供應增加。其功能異常是導致冠狀動脈痙攣、冠心病等心血管疾病的重要原因之一。
產(chǎn)品名稱 小鼠冠狀動脈平滑肌細胞
英文名稱:Mouse Coronary Artery Smooth Muscle Cells
貨號:YS-01X7284
組織來源 冠狀動脈
種屬 小鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡介:實驗室分離的小鼠冠狀動脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶 - 膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:實驗室分離的小鼠冠狀動脈平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%胰蛋白酶小鼠冠狀動脈平滑肌細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

小鼠冠狀動脈平滑肌細胞分離自冠狀動脈組織;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動脈的分布分為三型:右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干,發(fā)自左主動脈竇,經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構(gòu)成冠狀動脈壁的主要細胞成分,細胞膜上分布著多種離子通道,如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化、超極化,調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖、炎癥及凋亡等。因此,原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細胞,對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài):大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

細胞組成:冠狀動脈中膜血管平滑肌細胞,血管收縮功能固有細胞
形態(tài)結(jié)構(gòu):梭形、長紡錘形,貼壁生長,分為收縮型與合成型,密集平行排列
分子標記:α-SMA、SM22α、Calponin、Desmin 陽性;CD31、Collagen Ⅰ 陰性
功能特性:調(diào)控冠狀動脈收縮與舒張,調(diào)節(jié)冠脈血流量,參與血管重構(gòu)、動脈硬化、血管狹窄病理過程

收縮舒張調(diào)節(jié)冠脈管徑,控制心肌供血血流量
維持血管壁張力、彈性與血管結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性
表型轉(zhuǎn)化參與血管損傷修復、內(nèi)膜增生重塑
異常增殖遷移,誘發(fā)冠脈硬化、血管狹窄病變

1.將剪碎的組織塊轉(zhuǎn)移至含0.1%膠原酶Ⅰ+0.1%透明質(zhì)酸酶混合消化液的離心管中,37℃恒溫振蕩消化20-30分鐘,期間每隔10分鐘輕輕搖晃一次
2.消化結(jié)束后,直接加入等體積預熱的專用培養(yǎng)基終止消化,用200目細胞篩一次性過濾細胞懸液,無需離心棄上清
3.將過濾后的細胞懸液直接接種至提前包被好的培養(yǎng)瓶中,放入37℃、5%CO?培養(yǎng)箱
4.接種24小時后進行首次半換液,僅更換一半培養(yǎng)基,利用內(nèi)皮細胞貼壁速度快的特性自然純化,無需額外差速貼壁或IgG吸附操作
5.此后每2-3天更換一次培養(yǎng)基,待細胞融合度達到80%左右時進行傳代

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