小鼠膀胱成纖維細胞是分布于小鼠膀胱壁間質(zhì)中的成纖維樣細胞,可分泌細胞外基質(zhì)維持膀胱壁的結(jié)構(gòu)彈性,同時參與膀胱損傷后的修復(fù)與纖維化過程,常用于膀胱疾病研究。
產(chǎn)品名稱 小鼠膀胱成纖維細胞
英文名稱:Mouse Bladder Fibroblast Cells
貨號:YS-01X7250
組織來源 膀胱組織
種屬 小鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡介:實驗室分離的小鼠膀胱成纖維細胞采用胰蛋白酶 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:實驗室分離的小鼠膀胱成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%胰蛋白酶小鼠膀胱成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

小鼠膀胱成纖維細胞分離自膀胱組織;膀胱是一個儲尿器官,在哺乳類動物,它是由平滑肌組成的一個囊形結(jié)構(gòu),位于骨盆內(nèi),其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成,由內(nèi)向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成,稱為逼尿肌,逼尿肌收縮,可使膀胱內(nèi)壓升高,壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,形成尿道內(nèi)括約肌。在括約肌收縮能關(guān)閉尿道內(nèi)口,防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌、膀胱三角區(qū)肌)和黏膜層(極薄的一層移行上皮組織)。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的膀胱成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。膀胱成纖維細胞分泌的生長因子是一種具有多功能的促有絲分裂原,研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過程。近年來,堿性成纖維細胞生長因子在膀胱癌發(fā)病過程中的作用、與生物學(xué)行為之間的關(guān)系以及治療上的應(yīng)用已受到重視。

細胞組成:膀胱壁固有層、漿膜層結(jié)締組織成纖維細胞
形態(tài)結(jié)構(gòu):長紡錘形,排列松散,胞質(zhì)細長,間質(zhì)細胞典型形態(tài)
分子標記:Vimentin、Collagen Ⅰ、FSP1、TGF-β 受體
功能特性:合成膀胱細胞外基質(zhì),支撐膀胱壁彈性結(jié)構(gòu),參與膀胱纖維化、慢性炎癥與組織重塑

構(gòu)建膀胱間質(zhì)組織,分泌胞外基質(zhì)蛋白
維持膀胱壁彈性與組織結(jié)構(gòu)韌性
參與膀胱損傷修復(fù)與組織纖維化
調(diào)節(jié)膀胱局部炎癥微環(huán)境

1.將剪碎的組織塊轉(zhuǎn)移至含0.1%膠原酶Ⅰ+0.1%透明質(zhì)酸酶混合消化液的離心管中,37℃恒溫振蕩消化20-30分鐘,期間每隔10分鐘輕輕搖晃一次
2.消化結(jié)束后,直接加入等體積預(yù)熱的專用培養(yǎng)基終止消化,用200目細胞篩一次性過濾細胞懸液,無需離心棄上清
3.將過濾后的細胞懸液直接接種至提前包被好的培養(yǎng)瓶中,放入37℃、5%CO?培養(yǎng)箱
4.接種24小時后進行首次半換液,僅更換一半培養(yǎng)基,利用內(nèi)皮細胞貼壁速度快的特性自然純化,無需額外差速貼壁或IgG吸附操作
5.此后每2-3天更換一次培養(yǎng)基,待細胞融合度達到80%左右時進行傳代

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