用于檢測人樣本中細胞周期素A含量的試劑套裝。Cyclin-A在細胞周期的S期和G2/M期表達,可與CDK2、CDK1結(jié)合形成活性復合物,調(diào)控DNA復制和有絲分裂過程,是細胞周期順利推進的關鍵調(diào)控蛋白,其表達異常與細胞周期紊亂、腫瘤發(fā)生相關。
產(chǎn)品名稱 | 人細胞周期素A(Cyclin-A)elisa試劑盒 | 靈敏度 | 0.15625ng/mL |
英文名稱 | human Cyclin-A elisa kit | 貨號 | PH25845 |
檢測范圍 | 0.3125ng/mL-20ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夾心法數(shù)據(jù):
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實驗者需根據(jù)自己的實驗數(shù)據(jù)建立標準曲線。
| 校準品濃度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.713 | 1.568 | 0.837 | 0.495 | 0.292 | 0.156 | 0.092 | 0.042 |
| 校正OD值 | 2.672 | 1.526 | 0.796 | 0.453 | 0.250 | 0.115 | 0.050 | 0.000
|
夾心法標曲:

核心參數(shù):
檢測原理:雙抗體夾心法 ELISA,特異性抗體固相包被,抗原與酶標抗體夾心結(jié)合,TMB 底物顯色,酶標儀定量檢測。
種屬反應性:僅與人 Cyclin-A 反應,其他哺乳動物種屬無交叉結(jié)合。
樣本類型:血清、血漿、細胞裂解液、組織勻漿、培養(yǎng)上清。
檢測時間:3.5~4h。
保存條件:2~8℃冷藏,試劑避免反復凍融,板條密封保存。
特異性:與 Cyclin-B、Cyclin-D、Cyclin-E 無交叉反應。
變異系數(shù):板內(nèi)<8%;板間<10%。
操作步驟:
?試劑準備?:所有試劑恢復至室溫(18–25℃),洗滌液如有結(jié)晶需加熱溶解;
?標準品配制?:將凍干標準品用1mL標準品稀釋液溶解,得2000 pg/mL原液,再倍比稀釋成7個濃度梯度,另設空白孔(僅稀釋液);
?加樣?:每孔加入50μL樣本或標準品,37℃孵育30–60分鐘;
?洗板?:棄去孔內(nèi)液體,用1×洗滌液洗板5次,拍干;
?加酶標抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育1小時;
?洗板?:同上;
?顯色?:每孔加入50μL底物A + 50μL底物B,37℃避光孵育10–30分鐘;
?終止?:每孔加入50μL終止液,顏色由藍變黃;
?讀數(shù)?:在450 nm波長下用酶標儀測定OD值,根據(jù)標準曲線計算樣本濃度。
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關鍵字: 人細胞周期素A;Cyclin-A;elisa試劑盒;
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