A型禽流感病毒H1N1蛋白抗體
原理特點
特異性結(jié)合 A 型禽流感 H1N1 亞型相關(guān)靶蛋白，針對 H1N1 禽流感病毒特征抗原設(shè)計，特異性強、交叉反應(yīng)低?？捎糜跇颖局?H1N1 禽流感病毒的定性、半定量檢測與組織定位，主要用于禽類疫病監(jiān)測、病毒感染機制、疫苗及抗病毒制劑研發(fā)等科研工作。
英文名稱:H1N1 Matrix Protein 1 Rabbit pAb
中文名稱:A型禽流感病毒H1N1蛋白抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Influenza A virus(A/California/04/2009(H1N1))Matrix Protein-1; H1N1 M1.
交叉反應(yīng):Influenza A virus H1N1
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from H1N1 Matrix Protein 1
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：28 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
分子結(jié)構(gòu)：由H1血凝素（HA）和N1神經(jīng)氨酸酶（NA）組成的表面糖蛋白
核心功能：HA負(fù)責(zé)識別宿主細胞表面的唾液酸受體，介導(dǎo)病毒吸附和進入宿主細胞；NA負(fù)責(zé)切割病毒表面的唾液酸，促進病毒釋放
臨床意義：H1N1是引發(fā)禽流感和人流感大流行的重要亞型，其變異毒株可突破種屬屏障感染人類，導(dǎo)致嚴(yán)重的呼吸道疾病
樣本處理與實驗操作
1. Western Blot（免疫印跡）
樣本制備
細胞樣本：PBS洗滌2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑），冰上裂解30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清，BCA法定量蛋白濃度
組織樣本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，離心后取上清，調(diào)整蛋白濃度至一致
變性處理：加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘，冷卻后上樣
抗體孵育
轉(zhuǎn)膜完成后，用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時
一抗稀釋后4℃孵育過夜（12-16小時），或室溫孵育1-2小時；孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘；加入二抗（1:5000-1:10000稀釋）室溫孵育1-2小時
再次洗滌后，用ECL發(fā)光液顯影，通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P（石蠟切片免疫組化）
樣本前處理
脫蠟水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分鐘），最后用PBS沖洗
抗原修復(fù)：將切片放入檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波爐加熱至沸騰，保持10-15分鐘，自然冷卻至室溫
封閉處理：3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內(nèi)源性過氧化物酶，PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上，4℃孵育過夜；孵育時置于濕盒中，防止液體揮發(fā)
次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入二抗（生物素標(biāo)記）室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后，加入ABC復(fù)合物室溫孵育30分鐘，DAB顯色劑顯色（顯微鏡下觀察控制時間，通常3-10分鐘），蘇木素復(fù)染后脫水封片
3. ICC/IF（細胞免疫熒光）
樣本制備
細胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度，PBS洗滌2次，4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理（根據(jù)抗體類型選擇）：0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次
封閉處理：5% BSA室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上，4℃孵育過夜，或室溫孵育1-2小時
PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入熒光標(biāo)記二抗（1:200-1:500稀釋），室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后，用抗淬滅封片液封片，熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）
包被與封閉
用包被緩沖液（如碳酸鹽緩沖液pH9.6）稀釋抗原至合適濃度，每孔加入100μl，4℃包被過夜
棄去包被液，PBST洗滌3次，每次3分鐘；加入封閉液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小時
抗體孵育
一抗按比例稀釋后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小時，或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次，加入稀釋好的酶標(biāo)二抗，每孔100μl，37℃孵育1小時
洗滌后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光顯色10-20分鐘，加入終止液（2M H?SO?），用酶標(biāo)儀在450nm波長讀取OD值
公司正在出售的產(chǎn)品
人xue管內(nèi)皮生長因子單克隆抗體 | FITC標(biāo)記小鼠IgG1（同型對照） | CH25H Antibody Blocking Peptide |
高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 | Alexa Fluor 488標(biāo)記兔IgG（同型對照) | HOXA11 Antibody Blocking Peptide |
磷酸化神經(jīng)細胞正五聚體1抗體 | Alexa Fluor 594標(biāo)記大鼠IgG（同型對照) | CCDC73 Antibody Blocking Peptide |
zhongliu壞死因子受體1抗體 | 正常大鼠血清（原液） | GTF2A1LF Antibody Blocking Peptide |
白細胞蛋白酶3抗體 | 猴IgG（親和純化) | MAP3K7 Antibody Blocking Peptide |
磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 | 膠體金標(biāo)記的正常兔IgG | SAC3D1 Antibody Blocking Peptide |
原鈣粘附蛋白20抗體 | A型禽流感病毒H1N1蛋白抗體AF405標(biāo)記的人IgG | slc2a12 Antibody Blocking Peptide |
快速骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體 | 山羊IgG（Blockers 阻斷劑） | PAIP2 Antibody Blocking Peptide |
軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體 | Cy7標(biāo)記小鼠IgG（同型對照) | phospho-E2F1 (Ser337) Antibody Blocking Peptide |
關(guān)鍵字： A型禽流感病毒H1N1蛋白抗體;28 kDa;Rabbit;
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