CD39/ENTPD1抗體
原理特點
靶向 CD39(外核苷三磷酸二磷酸水解酶 1,ENTPD1),可水解胞外核苷酸,調控胞外腺苷水平,參與免疫抑制、炎癥反應、血管功能調節(jié)。本抗體用于蛋白表達與定位檢測,適配多種免疫實驗,應用于免疫代謝、炎癥、腫瘤微環(huán)境、心血管研究。
英文名稱:ENTPD1/CD39 Rabbit pAb
中文名稱:CD39/ENTPD1抗體

Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:ENTP1_HUMAN; Ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1; EC:3.6.1.5; SPG64; ATPDase; NTPDase-1; NTPDase 1; CD39; CD 39; Ecto-ATP diphosphohydrolase 1(Ecto-ATPDase 1; Ecto-ATPase 1); Ecto-apyrase; Lymphoid cell activation antigen;
交叉反應:Human
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human CD39/entpd1
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量:58 kDa
濃度:1mg/ml
儲存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
家族歸屬:外切核苷酸酶家族成員
核心功能:表達于免疫細胞和內皮細胞表面,催化ATP/ADP水解為AMP,參與嘌呤能信號通路調控,抑制免疫細胞活化和炎癥反應
臨床意義:在腫瘤微環(huán)境中高表達,通過產生腺苷促進免疫抑制,是腫瘤免疫治療的潛在靶點;其缺失會導致自身免疫病和炎癥性腸病
核心實驗操作方法
1. Western Blot(WB)
抗體孵育
一抗孵育:用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度(如1:1000),4℃搖床緩慢孵育過夜;或室溫孵育1-2小時,孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌:用TBST緩沖液洗滌3次,每次5分鐘,洗去未結合的一抗;加入HRP標記二抗(1:5000-1:10000稀釋),室溫孵育1小時。
顯影:再次洗滌后,加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘,用化學發(fā)光成像儀采集圖像,根據信號強度調整曝光時間。
2. 免疫組化(IHC)
抗體孵育
一抗孵育:滴加稀釋后的一抗(如1:200)于組織切片上,置于濕盒中4℃孵育過夜;次日室溫復溫30分鐘,PBS沖洗3次,每次5分鐘。
二抗結合:加入生物素標記二抗(1:200)室溫孵育30分鐘,PBS沖洗后加入ABC復合物(1:100)室溫孵育30分鐘。
顯色封片:DAB顯色劑顯色3-10分鐘(顯微鏡下觀察控制時間),蘇木素復染1分鐘,梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光(IF)
抗體孵育
一抗孵育:用5% BSA稀釋抗體至工作濃度(如1:100),滴加在細胞爬片上,4℃避光孵育過夜;室溫復溫后PBS沖洗3次,每次5分鐘。
二抗結合:加入熒光標記二抗(如FITC標記抗兔IgG,1:200),室溫避光孵育30-60分鐘;PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察:熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察,激發(fā)波長根據二抗標記物選擇(如FITC為488nm)。
4. ELISA實驗
包被與孵育
包被:用包被緩沖液(pH9.6碳酸鹽緩沖液)稀釋抗原至1-10μg/ml,每孔加入100μl,4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育:棄去包被液,PBST洗滌3次,加入5% BSA封閉液200μl/孔,37℃孵育1小時;加入稀釋后的一抗100μl/孔,37℃孵育1-2小時或4℃過夜。
檢測:洗滌后加入酶標二抗(1:5000),37℃孵育1小時;TMB底物溶液顯色10-30分鐘,2M硫酸終止反應后,酶標儀450nm波長讀取OD值。
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關鍵字: CD39/ENTPD1抗體;Rabbit;58 kDa;
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