CD9蛋白抗體
原理特點
靶向四次跨膜蛋白 CD9,分布于多種體細胞與免疫細胞,調(diào)控細胞遷移、融合、信號傳導(dǎo)及外泌體功能??贵w特異性結(jié)合 CD9 抗原,適配 WB、IHC、IF、流式、免疫共沉淀等實驗,應(yīng)用于腫瘤轉(zhuǎn)移、生殖生物學(xué)、外泌體、免疫調(diào)控等科研方向。
英文名稱:CD9 Rabbit pAb
中文名稱:CD9蛋白抗體

Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:CD9 antigen; MIC3; MRP-1; BTCC-1; DRAP-27; TSPAN29; TSPAN-29; CD9_HUMAN.
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human CD9
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量:24 kDa
濃度:1mg/ml
儲存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
家族歸屬:四跨膜蛋白超家族(TM4SF)成員
分子特性:跨膜糖蛋白,由四個跨膜結(jié)構(gòu)域組成,在細胞膜上形成四聚體或與其他蛋白形成復(fù)合物
核心功能:參與細胞粘附、遷移、增殖和分化調(diào)控,調(diào)控細胞凋亡、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和免疫應(yīng)答過程;同時是多種病毒(如丙型肝炎病毒、登革熱病毒等)的受體
臨床意義:在多種腫瘤中高表達,促進腫瘤細胞侵襲和轉(zhuǎn)移,是潛在的腫瘤治療靶點;其表達水平可作為腫瘤預(yù)后評估的指標(biāo)
核心實驗操作方法
1. Western Blot(WB)
抗體孵育
一抗孵育:用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度(如1:1000),4℃搖床緩慢孵育過夜;或室溫孵育1-2小時,孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌:用TBST緩沖液洗滌3次,每次5分鐘,洗去未結(jié)合的一抗;加入HRP標(biāo)記二抗(1:5000-1:10000稀釋),室溫孵育1小時。
顯影:再次洗滌后,加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘,用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像,根據(jù)信號強度調(diào)整曝光時間。
2. 免疫組化(IHC)
抗體孵育
一抗孵育:滴加稀釋后的一抗(如1:200)于組織切片上,置于濕盒中4℃孵育過夜;次日室溫復(fù)溫30分鐘,PBS沖洗3次,每次5分鐘。
二抗結(jié)合:加入生物素標(biāo)記二抗(1:200)室溫孵育30分鐘,PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物(1:100)室溫孵育30分鐘。
顯色封片:DAB顯色劑顯色3-10分鐘(顯微鏡下觀察控制時間),蘇木素復(fù)染1分鐘,梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光(IF)
抗體孵育
一抗孵育:用5% BSA稀釋抗體至工作濃度(如1:100),滴加在細胞爬片上,4℃避光孵育過夜;室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次,每次5分鐘。
二抗結(jié)合:加入熒光標(biāo)記二抗(如FITC標(biāo)記抗兔IgG,1:200),室溫避光孵育30-60分鐘;PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察:熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察,激發(fā)波長根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇(如FITC為488nm)。
4. ELISA實驗
包被與孵育
包被:用包被緩沖液(pH9.6碳酸鹽緩沖液)稀釋抗原至1-10μg/ml,每孔加入100μl,4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育:棄去包被液,PBST洗滌3次,加入5% BSA封閉液200μl/孔,37℃孵育1小時;加入稀釋后的一抗100μl/孔,37℃孵育1-2小時或4℃過夜。
檢測:洗滌后加入酶標(biāo)二抗(1:5000),37℃孵育1小時;TMB底物溶液顯色10-30分鐘,2M硫酸終止反應(yīng)后,酶標(biāo)儀450nm波長讀取OD值。
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關(guān)鍵字: CD9蛋白抗體;Rabbit;24 kDa;
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