缺氧誘導(dǎo)因子2α /EPAS1抗體
原理特點(diǎn)
該抗體靶向HIF-2α，主要特異性調(diào)控血管生成、紅細(xì)胞生成、腫瘤低氧適應(yīng)，與HIF-1α功能差異化。該抗體可精準(zhǔn)檢測(cè)HIF-2α表達(dá)水平，特異性解析組織特異性低氧調(diào)控機(jī)制；同時(shí)可抑制其功能，阻斷血管新生與腫瘤低氧增殖。
英文名稱:HIF 2 alpha Rabbit pAb
中文名稱:缺氧誘導(dǎo)因子2α /EPAS1抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Basic helix loop helix PAS protein MOP2; Basic-helix-loop-helix-PAS protein MOP2; bHLHe73; Class E basic helix-loop-helix protein 73; ECYT4; Endothelial PAS domain containing protein 1; Endothelial pas domain protein 1; Endothelial PAS domain-containing protein 1; EPAS 1; EPAS-1; EPAS1; EPAS1_HUMAN; HIF 1 alpha like factor; HIF-1-alpha-like factor; HIF-2-alpha; HIF2-alpha; HIF2A; HLF; Hypoxia inducible factor 2 alpha; Hypoxia inducible factor 2 alpha subunit; Hypoxia-inducible factor 2-alpha; Member of PAS protein 2; Member of pas superfamily 2; MOP 2; MOP2; PAS domain-containing protein 2; PASD2.
交叉反應(yīng):Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from mouse HIF 2 Alpha
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
克隆號(hào)：None
理論分子量：96 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)背景：HIF-2α 與 HIF-1α 結(jié)構(gòu)同源但組織特異性不同，主要在內(nèi)皮、腎臟、肺、腫瘤干細(xì)胞表達(dá)，主導(dǎo)血管發(fā)育、紅細(xì)胞生成、腎癌驅(qū)動(dòng)。
作用原理：靶向 EPAS1 獨(dú)有差異肽段制備抗體，嚴(yán)格區(qū)分 HIF 各 α 亞型，無交叉反應(yīng)。
產(chǎn)品特點(diǎn)：可特異性標(biāo)記腎透明細(xì)胞癌、肺內(nèi)皮細(xì)胞；用于血管發(fā)育、腎癌靶向機(jī)制、慢性缺氧造血調(diào)控研究。
核心實(shí)驗(yàn)操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時(shí)，孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標(biāo)記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時(shí)。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度調(diào)整曝光時(shí)間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標(biāo)記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時(shí)間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細(xì)胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標(biāo)記二抗（如FITC標(biāo)記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時(shí)；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。
檢測(cè)：洗滌后加入酶標(biāo)二抗（1:5000），37℃孵育1小時(shí)；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm波長讀取OD值。
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關(guān)鍵字： 缺氧誘導(dǎo)因子2α /EPAS1抗體;Rabbit;96 kDa;
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