產(chǎn)品編號：Y075
產(chǎn)品規(guī)格：>5×105細(xì)胞數(shù)
產(chǎn)品價格：4880
包裝規(guī)格：1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞詳述：
主動脈內(nèi)皮細(xì)胞（aortic endothelial cells）組成了主動脈內(nèi)壁，并持續(xù)受到血流剪切應(yīng)力的影響。內(nèi)皮細(xì)胞在切應(yīng)力的作用下，分泌不同的內(nèi)皮因子并進(jìn)而影響血管收縮和生長。主動脈內(nèi)皮細(xì)胞也調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附分子的表達(dá)來控制和精確調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和組織纖維化。體外培養(yǎng)的原代主動脈內(nèi)皮細(xì)胞可有效地幫助研究者研究內(nèi)皮功能失調(diào)的機理，動脈粥樣化等疾病的發(fā)病機理以及發(fā)展新的治療方法。
細(xì)胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的正常主動脈組織。
2) 細(xì)胞鑒定：血小板-內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子（PECAM-1/CD31）或血管假性血友
病因子（vWF）免疫熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5) 細(xì)胞生長方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
a、細(xì)胞傳代：如果未超過80%匯合度時，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細(xì)胞密度超80%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
貼壁細(xì)胞傳代步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2的比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個T25瓶），補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
懸浮細(xì)胞傳代步驟日下：
1、半換液法
半換液處理，豎著培養(yǎng)瓶在培養(yǎng)箱靜置1小時左右，輕輕吸掉3ml左右培養(yǎng)基，然后補給3ml的完全培養(yǎng)基，如果培養(yǎng)基變色慢，可直接加500ul左右FBS，傳代的時候可以直接補給5ml培養(yǎng)基 分兩個培養(yǎng)瓶培養(yǎng)，一般這樣傳代3次左右可以離心傳代一次，去掉死細(xì)胞。
2、離心換液法
如需分瓶可以將細(xì)胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
b、細(xì)胞凍存：
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇：
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意佩戴防護(hù)面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含5ml完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞注意事項：有些細(xì)胞貼壁不牢，在運輸過程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個T25），補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
關(guān)鍵字： 大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞;進(jìn)口原裝原管細(xì)胞;ATCC細(xì)胞引種;ATCC細(xì)胞代購;雅吉細(xì)胞庫;
上海雅吉生物科技的核心業(yè)務(wù)主要圍繞生命科學(xué)研究所需的各類試劑、細(xì)胞、抗體及技術(shù)服務(wù)展開，具體可歸納為以下幾個方面：
細(xì)胞產(chǎn)品與技術(shù)平臺：
細(xì)胞產(chǎn)品：提供包括正常細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞在內(nèi)的多種細(xì)胞系。同時，公司也是美國ScienCell等品牌的原代細(xì)胞產(chǎn)品的代理商。
穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)：公司具備豐富的蛋白表達(dá)研究經(jīng)驗，能夠為客戶提供從基因序列到穩(wěn)定細(xì)胞株交付的一站式定制服務(wù)，應(yīng)用于基因功能研究、藥物篩選和重組蛋白生產(chǎn)等領(lǐng)域。
科研試劑：這是公司的基礎(chǔ)和優(yōu)勢業(yè)務(wù)。產(chǎn)品線全面覆蓋了分子生物學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和微生物學(xué)等多個學(xué)科。
ELISA試劑盒：提供人、大鼠、小鼠、犬、魚、雞、牛等多種物種以及植物的ELISA檢測試劑盒，在國內(nèi)眾多重點實驗室中廣泛使用并被科研文獻(xiàn)引用。生化試劑、抗體與血清：提供包括一抗、二抗、單克隆/多克隆抗體在內(nèi)的多種抗體產(chǎn)品，以及胎牛血清等細(xì)胞培養(yǎng)用血清。
蛋白研究相關(guān)試劑盒：提供超過300種針對不同樣本來源（動物、植物、微生物）和不同細(xì)胞器（如線粒體、外泌體）的蛋白提取及檢測試劑盒。