人花生四烯酸脂加氧酶3(ALOXE3)重組蛋白開展環(huán)氧脂類合成酶活分析、皮膚角質(zhì)層脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)、特應(yīng)性皮炎發(fā)病機(jī)制及底物催化動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)。

型號(hào)：YS-DB698

產(chǎn)品名稱：人花生四烯酸脂加氧酶3(ALOXE3)重組蛋白

物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Arachidonate Lipoxygenase 3 (ALOXE3)

ALOX-E3; LOX3; eLOX3; E-LOX; Epidermis-Type Lipoxygenase 3; Hydroperoxy icosatetraenoate dehydratase; Hydroperoxide isomerase ALOXE3

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：-

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測(cè)原理：

環(huán)氧合型脂氧合酶活檢測(cè)：底物催化生成環(huán)氧衍生物，色譜定量產(chǎn)物，測(cè)定 ALOXE3 特有環(huán)氧催化活性。

底物鏈長(zhǎng)選擇性驗(yàn)證：對(duì)比不同多不飽和脂肪酸催化效率，匹配該酶底物偏好。

SDS-PAGE 純度質(zhì)控：分析蛋白純度、寡聚聚集狀態(tài)。

免疫印跡亞型鑒定：特異性抗體確認(rèn) ALOXE3 重組蛋白表達(dá)正確。
公司正在出售的產(chǎn)品：

常見實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景操作指南：

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

濃度優(yōu)化：先設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn)梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），檢測(cè)細(xì)胞增殖、分化或信號(hào)通路激活情況，確定最優(yōu)工作濃度。

添加時(shí)機(jī)：細(xì)胞接種后24-48小時(shí)，待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時(shí)添加重組蛋白。

更換培養(yǎng)基：若蛋白半衰期較短，需每隔24-48小時(shí)更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。

免疫檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

陽(yáng)性對(duì)照設(shè)置：在ELISA或WB實(shí)驗(yàn)中，用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，確保定量準(zhǔn)確性。

封閉處理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉，降低非特異性結(jié)合。

抗體配對(duì)：選擇針對(duì)不同表位的捕獲抗體和檢測(cè)抗體，避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。

蛋白相互作用實(shí)驗(yàn)

標(biāo)簽選擇：若使用Pull-down實(shí)驗(yàn)，優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白，便于親和層析分離。

反應(yīng)條件：在生理緩沖液（如PBS）中進(jìn)行，溫度控制在4℃，避免蛋白變性。

陰性對(duì)照：設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對(duì)照組，排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。