人甲基丁烯酰輔酶A羧化酶2(MCCC2)重組蛋白開展 MCCC2 酶活性定量、亮氨酸代謝通路解析、相關(guān)遺傳性代謝病體外細(xì)胞模型驗證實驗。
型號:YS-DB2455
產(chǎn)品名稱:人甲基丁烯酰輔酶A羧化酶2(MCCC2)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Methylcrotonoyl Coenzyme A Carboxylase 2 (MCCC2)
MCCB; 3-methylcrotonyl-CoA carboxylase non-biotin-containing subunit; 3-methylcrotonyl-CoA:carbon dioxide ligase subunit beta; 3-methylcrotonyl-CoA carboxylase 2
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:28.4kDa
實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Arg337~Met563 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理:

WB 特異性定性:MCCC2 專屬抗體結(jié)合重組蛋白,電泳條帶大小符合預(yù)期分子量,排除雜蛋白污染。
SDS-PAGE 純度定量:電泳分離蛋白組分,灰度計算目標(biāo)蛋白純度。
羧化酶催化活性測定:以不飽和?;o酶 A 為底物,ATP 驅(qū)動羧化加成,產(chǎn)物色譜定量反映酶活力。
功能互補(bǔ)試驗:與 MCCC1 共重組共孵育可重建完整全酶活性,驗證 MCCC2 亞基結(jié)構(gòu)與功能正常。
公司正在出售的產(chǎn)品:

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常見實驗場景操作指南:

細(xì)胞培養(yǎng)實驗
濃度優(yōu)化:先設(shè)置預(yù)實驗梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),檢測細(xì)胞增殖、分化或信號通路激活情況,確定最優(yōu)工作濃度。
添加時機(jī):細(xì)胞接種后24-48小時,待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基:若蛋白半衰期較短,需每隔24-48小時更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測實驗
陽性對照設(shè)置:在ELISA或WB實驗中,用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,確保定量準(zhǔn)確性。
封閉處理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉,降低非特異性結(jié)合。
抗體配對:選擇針對不同表位的捕獲抗體和檢測抗體,避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
蛋白相互作用實驗
標(biāo)簽選擇:若使用Pull-down實驗,優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白,便于親和層析分離。
反應(yīng)條件:在生理緩沖液(如PBS)中進(jìn)行,溫度控制在4℃,避免蛋白變性。
陰性對照:設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對照組,排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。
關(guān)鍵字: 人甲基丁烯酰輔酶A羧化酶2;MCCC2;重組蛋白;
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