人溶血卵磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶3(LPCAT3)重組蛋白適用于多不飽和磷脂合成檢測(cè)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)、脂質(zhì)過(guò)氧化與細(xì)胞鐵死亡相關(guān)體外功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。
型號(hào):YS-DB878
產(chǎn)品名稱:人溶血卵磷脂?;D(zhuǎn)移酶3(LPCAT3)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 3 (LPCAT3)
MBOAT5; C3F; OACT5; Nessy; LPSAT; Membrane Bound O-AcylTransferase Domain Containing 5; Lysophospholipid Acyltransferase 5; Lysophosphatidylserine acyltransferase
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔
預(yù)測(cè)分子量:19.2kDa
實(shí)際分子量:19kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Met122~Arg233 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose .
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):6.3
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測(cè)原理:

膜磷脂重塑?;D(zhuǎn)移反應(yīng):LPCAT3 介導(dǎo)脂酰 CoA ?;D(zhuǎn)移至溶血卵磷脂,生成完整磷脂分子,產(chǎn)物量表征酶活。
液相色譜分離磷脂定量:HPLC 分離反應(yīng)體系內(nèi)卵磷脂與溶血卵磷脂,外標(biāo)法計(jì)算轉(zhuǎn)化率,量化酶活力。
免疫印跡純度質(zhì)控:特異性抗體檢測(cè)重組 LPCAT3,確認(rèn)蛋白表達(dá)無(wú)誤、無(wú)明顯降解。
底物偏好性特征佐證:LPCAT3 偏好多不飽和脂酰 CoA 底物,活性差異可區(qū)分于 LPCAT 家族其他亞型。
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不同實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景使用方法:

1. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(細(xì)胞刺激、增殖、分化、趨化)
用無(wú)血清培養(yǎng)基或基礎(chǔ)培養(yǎng)基稀釋蛋白至工作濃度
按所需終濃度直接加入細(xì)胞培養(yǎng)體系
現(xiàn)配現(xiàn)用,避免室溫長(zhǎng)時(shí)間放置降解
設(shè)置空白對(duì)照組、溶劑對(duì)照組
2. 體外酶活 / 結(jié)合實(shí)驗(yàn)(蛋白互作、ELISA、SPR、酶動(dòng)力學(xué))
用匹配 pH、離子強(qiáng)度反應(yīng)緩沖液稀釋
冰上配制,全程低溫減少降解
按體系體積依次加樣,啟動(dòng)反應(yīng),設(shè)置陰性對(duì)照
3. 動(dòng)物體內(nèi)注射(尾靜脈、腹腔、皮下給藥)
復(fù)溶后透析置換為無(wú)菌生理鹽水 / PBS,去除緩沖鹽、防腐劑
0.22 μm 過(guò)濾除菌,無(wú)菌分裝
根據(jù)動(dòng)物體重計(jì)算給藥劑量,現(xiàn)配現(xiàn)用
4. 蛋白免疫(制備抗體)
蛋白與佐劑等體積混勻乳化
多點(diǎn)皮下或肌肉注射免疫動(dòng)物,按免疫程序加強(qiáng)免疫
5. WB / 標(biāo)準(zhǔn)品、校準(zhǔn)品使用
稀釋成梯度濃度,上樣做標(biāo)準(zhǔn)曲線或陽(yáng)性對(duì)照
關(guān)鍵字: 人溶血卵磷脂?;D(zhuǎn)移酶3;LPCAT3;重組蛋白;
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