人肉毒堿-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(CORT)重組蛋白開展肉堿甲基化代謝體外酶活檢測、脂肪酸跨線粒體轉(zhuǎn)運調(diào)控、脂質(zhì)能量代謝相關(guān)體外功能研究實驗。
型號：YS-DB2323
產(chǎn)品名稱：人肉毒堿-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(CORT)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant Carnitine-O-Octanoyltransferase (CORT)
COT; CROT; Peroxisomal Carnitine O-Octanoyltransferase
酶與激酶
代謝通路
神經(jīng)科學(xué)
物種：Homo sapiens (Human，人)
來源：原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位：：n/a
預(yù)測分子量：26.8kDa
實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽：Lys410~Leu612 with
緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性狀：凍干粉
純度：> 90%
等電點：-
應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：
甲基轉(zhuǎn)移催化基礎(chǔ)原理：CORT 以 SAM（S - 腺苷甲硫氨酸）為甲基供體，將甲基轉(zhuǎn)移至肉毒堿氧原子位點，生成 O - 甲基肉毒堿。
HPLC 分離甲基化產(chǎn)物定量：色譜分離底物肉毒堿與甲基化產(chǎn)物，峰面積計算甲基轉(zhuǎn)移效率，測定酶活。
免疫印跡重組蛋白鑒定：CORT 特異性抗體驗證蛋白分子量正確、純度合格。
甲基供體缺失對照：去除 SAM 后無甲基化產(chǎn)物，證明反應(yīng)由 CORT 特異性介導(dǎo)。
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復(fù)溶操作要點：
復(fù)溶前準(zhǔn)備
工具消毒：移液槍頭、離心管需經(jīng)過高壓滅菌或一次性無菌處理，避免引入污染。
緩沖液選擇：優(yōu)先使用產(chǎn)品說明書推薦的專用復(fù)溶緩沖液，若無推薦可使用：
基礎(chǔ)型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl
保護型：在基礎(chǔ)緩沖液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢劑（如0.05% Triton X-100），酶類需添加輔酶因子
復(fù)溶步驟
短暫離心：將凍干蛋白管置于離心機，4℃下8000rpm離心30秒，使底部蛋白集中。
緩慢加液：沿管壁緩慢加入適量緩沖液，避免直接沖擊蛋白沉淀。
溫和溶解：輕輕搖晃離心管或用移液槍緩慢吹吸，禁止渦旋振蕩（易導(dǎo)致蛋白變性）。
靜置溶解：4℃靜置10-30分鐘，難溶蛋白可延長至1小時，期間每隔10分鐘輕輕混勻一次。
關(guān)鍵字： 人肉毒堿-O-甲基轉(zhuǎn)移酶;CORT;重組蛋白;
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