人生物素酰胺酶(BTD)重組蛋白用于生物素循環(huán)代謝體外酶活測定、生物素營養(yǎng)代謝缺陷疾病、羧化酶活性調(diào)控相關(guān)體外機制研究實驗。
型號：YS-DB2035
產(chǎn)品名稱：人生物素酰胺酶(BTD)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant Biotinidase (BTD)
Biotinase
酶與激酶
物種：Homo sapiens (Human，人)
來源：原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位：：分泌
預(yù)測分子量：30.1kDa
實際分子量：30kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽：Ala42~Ala271 with N-terminal His Tag
緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性狀：凍干粉
純度：> 97%
等電點：5.4
應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：
生物素酰胺鍵水解催化原理：BTD 水解生物素 - 賴氨酸酰胺鍵，釋放游離生物素，參與體內(nèi)生物素循環(huán)回收。
熒光標記生物素綴合物檢測：酶切后釋放游離熒光生物素，熒光信號強弱定量 BTD 水解活性。
免疫印跡蛋白質(zhì)控：BTD 特異性抗體確認重組蛋白分子量、無降解、表達正確。
酰胺鍵底物專一性驗證：酯鍵、肽鍵類似底物不發(fā)生水解，證明 BTD 針對生物素酰胺鍵特異性催化。
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蛋白復(fù)溶與保存：
1. 復(fù)溶前準備
實驗環(huán)境：在超凈工作臺內(nèi)進行操作，避免污染
試劑準備：無菌水、PBS緩沖液或產(chǎn)品說明書指定的復(fù)溶液
工具準備：無菌移液器、槍頭、離心管
2. 復(fù)溶步驟
短暫離心：將蛋白凍干粉管短暫離心（1000rpm，1min），使管壁和管蓋的蛋白粉末集中到管底
加入復(fù)溶液：按照說明書推薦的體積加入無菌水或指定復(fù)溶液，輕輕吹打混勻，避免渦旋振蕩防止蛋白變性
靜置溶解：室溫靜置5-10分鐘，期間可輕輕顛倒離心管幫助溶解，避免劇烈振蕩
分裝保存：根據(jù)實驗需要將復(fù)溶后的蛋白分裝成小份（如10μg/份），避免反復(fù)凍融
3. 保存條件
長期保存：-20℃或-80℃避光保存，加入50%甘油可提高穩(wěn)定性
短期保存：4℃可穩(wěn)定保存1-2周，需避免反復(fù)凍融
注意：
避免接觸強氧化劑、強酸強堿環(huán)境
若蛋白出現(xiàn)沉淀或渾濁，可4℃放置或短暫離心后取上清使用
關(guān)鍵字： 人生物素酰胺酶;BTD;重組蛋白;
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