人絲氨酸蛋白酶12(PRSS12)重組蛋白適用于胞外基質(zhì)重塑、神經(jīng)發(fā)育、組織修復(fù)及蛋白酶水解活性體外定量檢測實(shí)驗(yàn)。
型號：YS-DB2229
產(chǎn)品名稱：人絲氨酸蛋白酶12(PRSS12)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant Protease, Serine 12 (PRSS12)
BSSP-3; MRT1; Neurotrypsin; Motopsin; Leydin
酶與激酶
神經(jīng)科學(xué)
發(fā)育科學(xué)
物種：Homo sapiens (Human，人)
來源：原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位：：分泌
預(yù)測分子量：28.0KDa
實(shí)際分子量：25kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽：Glu17~Ser235 with N-terminal His Tag
緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性狀：凍干粉
純度：> 95%
等電點(diǎn)：8.8
應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：
肽鍵選擇性水解催化原理：PRSS12 作為絲氨酸蛋白酶，活性位點(diǎn)絲氨酸親核進(jìn)攻多肽肽鍵，切割水解靶底物。
發(fā)色多肽底物比色檢測：酶切底物釋放可溶性生色基團(tuán)，特定波長吸光度上升速率定量蛋白酶活力。
免疫印跡重組蛋白質(zhì)控：PRSS12 特異性抗體驗(yàn)證蛋白表達(dá)、分子量及純度。
絲氨酸蛋白酶抑制劑驗(yàn)證：PMSF 等絲氨酸蛋白酶抑制劑可完全抑制活性，區(qū)分半胱氨酸、金屬蛋白酶污染。
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常見實(shí)驗(yàn)場景操作指南：
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
濃度優(yōu)化：先設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn)梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），檢測細(xì)胞增殖、分化或信號通路激活情況，確定最優(yōu)工作濃度。
添加時機(jī)：細(xì)胞接種后24-48小時，待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基：若蛋白半衰期較短，需每隔24-48小時更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測實(shí)驗(yàn)
陽性對照設(shè)置：在ELISA或WB實(shí)驗(yàn)中，用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，確保定量準(zhǔn)確性。
封閉處理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉，降低非特異性結(jié)合。
抗體配對：選擇針對不同表位的捕獲抗體和檢測抗體，避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
蛋白相互作用實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽選擇：若使用Pull-down實(shí)驗(yàn)，優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白，便于親和層析分離。
反應(yīng)條件：在生理緩沖液（如PBS）中進(jìn)行，溫度控制在4℃，避免蛋白變性。
陰性對照：設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對照組，排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。
關(guān)鍵字： 人絲氨酸蛋白酶12;PRSS12;重組蛋白;
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