人絲裂原激活蛋白激酶10(MAPK10)重組蛋白用于 JNK3 激酶活性檢測、神經(jīng)細胞凋亡、應激應答及神經(jīng)退行性疾病體外通路驗證實驗。
型號：YS-DB2084
產(chǎn)品名稱：人絲裂原激活蛋白激酶10(MAPK10)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase 10 (MAPK10)
JNK3; SAPK1b; PRKM10; Stress-activated protein kinase 1b; Stress-activated protein kinase JNK3; c-Jun N-terminal kinase 3; MAP kinase p49 3F12
酶與激酶
感染免疫
物種：Homo sapiens (Human，人)
來源：原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位：：Cytoplasm. Membrane; Lipid-anchor. Nucleus. Mitochondrio
預測分子量：31.9kDa
實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽：Arg88~Ala332 with
緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性狀：凍干粉
純度：> 95%
等電點：9.3
應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：
下游靶蛋白絲蘇氨酸磷酸化催化：活化 MAPK10 消耗 ATP，磷酸化轉錄因子、多肽底物特定絲氨酸 / 蘇氨酸位點。
32P 放射性同位素摻入法定量激酶活：放射性磷酸基團整合至底物，沉淀計數(shù)量化磷酸轉移效率。
免疫印跡重組蛋白鑒定：MAPK10 特異性抗體驗證蛋白表達完整、分子量正確。
上游激活激酶依賴性驗證：MAPK10 需要上游激酶磷酸化激活，未活化蛋白無催化活性，匹配 MAPK 通路調(diào)控特征。
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常見實驗場景操作指南：
細胞培養(yǎng)實驗
濃度優(yōu)化：先設置預實驗梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），檢測細胞增殖、分化或信號通路激活情況，確定最優(yōu)工作濃度。
添加時機：細胞接種后24-48小時，待細胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基：若蛋白半衰期較短，需每隔24-48小時更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測實驗
陽性對照設置：在ELISA或WB實驗中，用已知濃度的重組蛋白制備標準曲線，確保定量準確性。
封閉處理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉，降低非特異性結合。
抗體配對：選擇針對不同表位的捕獲抗體和檢測抗體，避免與重組蛋白的標簽產(chǎn)生交叉反應。
蛋白相互作用實驗
標簽選擇：若使用Pull-down實驗，優(yōu)先選擇GST或His標簽的重組蛋白，便于親和層析分離。
反應條件：在生理緩沖液（如PBS）中進行，溫度控制在4℃，避免蛋白變性。
陰性對照：設置不含目標蛋白的對照組，排除標簽非特異性結合的干擾。
關鍵字： 人絲裂原激活蛋白激酶10;MAPK10;重組蛋白;
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