本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，微孔板包被純化的大鼠FGF-10特異性捕獲抗體，加入標準品與大鼠生物樣本后，樣本中的FGF-10抗原被固相抗體特異性捕獲，洗板凈化反應(yīng)體系，加入辣根過氧化物酶標記的FGF-10檢測抗體形成夾心復(fù)合物，底物顯色后吸光度與抗原濃度正相關(guān)，終止反應(yīng)后上機讀數(shù)，結(jié)合標準曲線完成定量檢測。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠成纖維細胞生長因子10(FGF-10)ELISA試劑盒

英文名稱：FGF-10 ELISA Kit
貨號：Y-E1019

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢出限0.06ng/mL，可精準檢測大鼠組織修復(fù)相關(guān)微量生長因子。

檢測范圍：0.2ng/mL - 6ng/mL，適用于大鼠皮膚、肺、腸道組織及血清FGF-10檢測。

反應(yīng)時間：總時長105分鐘，樣本孵育40min、酶抗體孵育30min、顯色30min、終止讀數(shù)5min。

保存條件：全套試劑2 - 8℃密封避光保存，標準品干粉長期冷藏，溶解后現(xiàn)配現(xiàn)用。

有效期：原裝試劑盒有效期6個月，反復(fù)開蓋會縮短試劑有效期。

顯色系統(tǒng)：高穩(wěn)定TMB顯色體系，高低濃度樣本顯色梯度清晰。

檢測波長：450nm主波長，620nm參比波長校正背景誤差。

標準曲線繪制：六梯度稀釋標準品，四參數(shù)擬合曲線，R2≥0.995。

特異性：特異性結(jié)合大鼠FGF-10，與FGF家族其他亞型無交叉反應(yīng)，特異性專一。

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤3.8%，板間CV≤5.8%，數(shù)據(jù)穩(wěn)定性良好。

注意事項：生長因子易降解，樣本采集后需快速低溫離心分裝，避免反復(fù)凍融；孵育過程保證濕度充足，防止孔內(nèi)液體蒸發(fā)濃縮；讀數(shù)前輕輕震蕩酶標板，保證孔內(nèi)液體均勻。
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

FGF-10 標準品梯度稀釋，試劑盒室溫平衡 31min，標記酶標板所有微孔；

標準孔、待測孔加入 50μL 標準品、大鼠細胞培養(yǎng)液，空白孔加稀釋液；

快速加入 100μL HRP 標記抗 FGF-10 特異性抗體，密封酶標板；

37℃恒溫孵育 67min，一步完成抗原標記抗體結(jié)合；

洗板液浸泡微孔 35s，拍干，循環(huán)洗板 5 次；

避光加入顯色底物 A、B 各 50μL，37℃避光反應(yīng) 15min；

終止液終止反應(yīng)，450nm 讀取 OD 值，計算 FGF-10 含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：