雙抗體夾心免疫酶聯(lián)原理，板底包被抗 E-Cad 捕獲抗體，樣本上皮黏附蛋白 E-Cad 結(jié)合固相抗體，酶標(biāo)二抗識別抗原第二表位，洗滌顯色后定量上皮屏障相關(guān) E-Cad 蛋白。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1571 |
英文名稱 | E-Cad ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測限0.08ng/mL，可精準(zhǔn)檢測大鼠上皮組織微量E-Cad表達(dá)
檢測范圍：0.15ng/mL - 100ng/mL，覆蓋腫瘤、組織損傷模型大鼠樣本濃度
反應(yīng)時間：總反應(yīng)時長130分鐘，樣本孵育70分鐘，酶孵育30分鐘，顯色15分鐘，終止5分鐘
保存條件：2 - 8℃避光冷藏保存，微孔板密封防潮，試劑避免室溫久置
有效期：原裝未拆封有效期6個月，規(guī)范儲存活性穩(wěn)定
顯色系統(tǒng)：高靈敏TMB顯色體系，低表達(dá)樣本顯色清晰
檢測波長：450nm檢測，570nm輔助校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：7點(diǎn)梯度標(biāo)準(zhǔn)濃度，四參數(shù)擬合，R2≥0.996
特異性：特異性結(jié)合大鼠E-鈣黏蛋白，與N-鈣黏蛋白無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤5%，板間CV≤7%，重復(fù)性優(yōu)異
注意事項(xiàng)：上皮組織樣本需充分裂解，去除雜質(zhì)；避免樣本反復(fù)凍融破壞蛋白結(jié)構(gòu)；洗滌徹底，降低非特異性結(jié)合背景
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑平衡：試劑室溫放置 30min，洗滌液 1:20 稀釋，上皮組織裂解液回暖混勻。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：E-Cad 標(biāo)準(zhǔn)品溶解梯度稀釋 6 梯度，空白孔僅加稀釋液。
加樣孵育：每孔 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品 / 樣本，酶結(jié)合物 50μL，37℃避光孵育 63min。
洗板操作：洗滌液浸泡 34s，徹底拍干，洗板 6 次。
底物顯色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 17min。
終止讀數(shù)：終止液混勻，10min 內(nèi) 450nm 讀數(shù)。
數(shù)據(jù)計(jì)算：標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 E-Cad，檢測上皮細(xì)胞間黏附能力。
關(guān)鍵字： 大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白;E-Cad;ELISA試劑盒;
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