本試劑盒運用雙抗體夾心ELISA檢測原理,酶標板微孔固定純化的大鼠CETP特異性捕獲抗體,加入梯度標準品和待測大鼠樣本,樣本中的CETP抗原與固相抗體特異性結合,洗滌去除非特異性結合成分,加入辣根過氧化物酶標記的CETP檢測抗體,形成穩(wěn)定的夾心免疫復合物,經洗滌后進行底物顯色反應,顯色深淺與樣本CETP含量正相關,終止顯色后檢測OD值,對照標準曲線完成定量檢測。
基本參數?:

產品名稱:大鼠膽固醇酯轉移蛋白(CETP)ELISA試劑盒
英文名稱:CETP ELISA Kit
貨號:Y-E1267
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢測靈敏度≤1.0ng/mL
檢測范圍:2.0ng/mL - 60ng/mL
反應時間:總反應時長90分鐘(抗原結合60分鐘、顯色30分鐘)
保存條件:2-8℃避光密封保存,禁止冷凍蛋白抗體組分
有效期:未開封12個月,開封后1個月內有效
顯色系統(tǒng):TMB高靈敏度顯色體系,適配轉運蛋白低濃度檢測
檢測波長:450nm/630nm雙波長檢測
標準曲線繪制:四參數Logistic擬合標準曲線,梯度濃度覆蓋全檢測區(qū)間
重復性:板內CV≤7%,板間CV≤9%
特異性:特異性結合大鼠CETP,與血脂相關轉運蛋白無交叉反應
注意事項:血清樣本需澄清,脂血樣本會遮擋反應、影響結果;實驗溫度需恒定37℃,保證結合穩(wěn)定性。
試劑盒組成:

預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結合目標物,提供酶結合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物,產生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應,穩(wěn)定顯色結果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結合物質
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下:

試劑盒室溫回溫 35min,洗滌緩沖液 1:26 稀釋,大鼠血漿樣本離心去除脂蛋白沉淀。
各微孔添加 100μL 梯度 CETP 標準品、待測血漿、空白稀釋液。
一步法酶結合液 200μL 每孔,避光 37℃孵育 72min。
洗滌液浸泡 42s,洗滌 5 次,垂直拍干微孔。
單一顯色液 100μL 避光孵育 19min。
硫酸終止液中和顯色,震蕩混勻。
酶標儀測 OD450,定量 CETP 蛋白表達量。
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關鍵字: 大鼠膽固醇酯轉移蛋白;CETP;ELISA試劑盒;
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