雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),微孔板固定抗大鼠 β-EPR 捕獲抗體,樣本可溶性 β 內(nèi)啡肽受體結(jié)合固相抗體,洗除游離組分后加入酶標(biāo)抗 β-EPR 檢測(cè)抗體形成夾心復(fù)合物,底物顯色讀數(shù),標(biāo)準(zhǔn)曲線定量受體蛋白含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1110 |
英文名稱 | β-EPR ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測(cè)靈敏度≤2.0pg/mL
檢測(cè)范圍:5pg/mL - 1600pg/mL
反應(yīng)時(shí)間:總反應(yīng)時(shí)長180分鐘(90分鐘樣本溫育+30分鐘二抗溫育+30分鐘顯色)
保存條件:2-8℃避光冷藏,受體蛋白試劑嚴(yán)禁冷凍
有效期:未開封試劑盒12個(gè)月
顯色系統(tǒng):HRP-TMB顯色體系
檢測(cè)波長:450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:梯度標(biāo)準(zhǔn)品OD值四參數(shù)回歸擬合,計(jì)算受體蛋白濃度
特異性:特異性識(shí)別大鼠β-EPR,與其他阿片受體無交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤6%,板間CV≤8%
注意事項(xiàng):細(xì)胞膜蛋白提取樣本需純凈,去除胞質(zhì)雜質(zhì);洗板徹底,降低非特異性結(jié)合背景。
儲(chǔ)存與有效期:
未開封整套試劑盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷凍;有效期 12 個(gè)月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條:自封袋密封,內(nèi)置干燥劑 2~8℃避光;1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
濃縮洗滌液:2~30℃常溫保存,結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品:分裝 - 20℃凍存,避免反復(fù)凍融,1 個(gè)月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
試劑平衡:全部試劑室溫放置 29min,濃縮洗滌液 1:20 稀釋備用。
標(biāo)準(zhǔn)品配制:β-EPR 凍干標(biāo)準(zhǔn)品充分溶解,梯度稀釋 7 個(gè)濃度梯度。
加樣:標(biāo)準(zhǔn)孔 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品,神經(jīng)細(xì)胞膜蛋白勻漿 50μL 加入檢測(cè)孔。
酶抗體孵育:每孔 50μL HRP-β-EPR 抗體,密封 37℃避光孵育 66min。
洗板:洗滌液浸泡 36s,拍干,洗板 6 次。
顯色:底物 A、B 各 50μL,避光 37℃顯色 17min。
終止讀數(shù):終止液搖勻,9min 內(nèi) 450nm 檢測(cè),計(jì)算 β-EPR 受體含量。
關(guān)鍵字: 大鼠β內(nèi)啡肽受體;β-EPR;ELISA試劑盒;
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