本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯免疫吸附法,酶標板微孔包被純化的大鼠GAL特異性抗體,加入標準品和待測大鼠神經、血清樣本,樣本中的GAL抗原與固相抗體特異性結合,洗滌去除游離成分,加入HRP標記的GAL檢測抗體,形成穩(wěn)定免疫復合物,洗滌后進行酶促顯色反應,終止后測定吸光度,依據標準曲線計算樣本中GAL的濃度。
基本參數?:

產品名稱:大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA試劑盒
英文名稱:GAL ELISA Kit
貨號:Y-E1116
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢測靈敏度0.1pg/mL,超靈敏檢測,適配神經肽微量檢測需求
檢測范圍:0.2pg/mL~50pg/mL,覆蓋大鼠神經、內分泌組織GAL表達濃度
反應時間:總實驗時長120分鐘,孵育90分鐘,顯色30分鐘
保存條件:2~8℃避光冷藏,肽類標準品單獨低溫密封保存
有效期:未開封有效期6個月,開封后20天內用完
顯色系統(tǒng):超靈敏TMB顯色體系,適配微量神經肽檢測
檢測波長:450nm檢測,630nm背景校正
標準曲線繪制:7梯度低濃度標準稀釋,四參數擬合,R2≥0.992
特異性:特異性結合大鼠甘丙肽,與其他神經肽無交叉反應
重復性:板內CV≤5%,板間CV≤7%
注意事項:神經樣本采集后立即速凍保存,防止肽類降解;全程避光低溫操作;洗滌充分,去除非特異性結合雜質;標準品現配現用。
關鍵注意事項:

實驗前需仔細閱讀對應試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現假陽性結果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結果
實驗步驟如下:

試劑盒室溫回溫 31min,濃縮洗滌液 1:24 稀釋,大鼠下丘腦勻漿避光冰浴,防止多肽降解。
酶標板每孔添加 100μL GAL 梯度標準多肽、下丘腦上清、空白緩沖液。
酶標記抗 GAL 抗體 100μL / 孔,密封 37℃孵育 72min。
洗滌浸泡 36s,洗滌 5 次,垂直拍干微孔殘留液體。
避光 TMB 顯色液 100μL,37℃避光顯色 18min。
滴加終止液充分混勻微孔。
讀取 OD450 數值,定量甘丙肽 GAL 多肽濃度。
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關鍵字: 大鼠甘丙肽/甘丙素;GAL;ELISA試劑盒;
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