雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，微孔板包被抗大鼠 IL-12 P40 亞基特異性捕獲抗體，樣本游離 P40 亞基結(jié)合固相抗體，洗除雜蛋白后加入酶標(biāo)記抗 P40 檢測抗體形成夾心復(fù)合物，底物顯色測 OD 值，定量 IL-12 P40 單體含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1540 |
英文名稱 | IL-12/P40 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測靈敏度≤2pg/mL
檢測范圍：4pg/mL - 320pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育120分鐘，二抗孵育60分鐘，避光顯色15分鐘
保存條件：2-8℃避光冷藏，試劑密封防潮，禁止冷凍
有效期：未開封有效期6個(gè)月
顯色系統(tǒng)：高靈敏度TMB顯色體系
檢測波長：450nm讀取OD值
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：標(biāo)準(zhǔn)品倍比稀釋，檢測對(duì)應(yīng)吸光度，四參數(shù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算P40亞基濃度
特異性：特異性識(shí)別大鼠IL-12 P40亞基，不與P70亞基及其他白介素交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤9%
注意事項(xiàng)：1. 避免樣本反復(fù)凍融，保護(hù)蛋白活性；2. 洗板充分，消除非特異性吸附；3. 孵育溫度恒定，保證反應(yīng)一致性；4. 獨(dú)立批次試劑單獨(dú)使用。
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑平衡：試劑盒室溫平衡 22min，20 倍洗滌液稀釋混勻，底物避光保存。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：IL-12 P40 標(biāo)準(zhǔn)品溶解配置 6 組梯度，空白零孔。
樣本上樣：標(biāo)準(zhǔn)孔 50μL 標(biāo)準(zhǔn)液，樹突狀細(xì)胞上清樣本 50μL 上樣。
孵育反應(yīng)：每孔 50μL HRP 標(biāo)記 P40 亞基特異性抗體，封膜 37℃避光孵育 58min。
洗板：洗滌液浸泡 30s，拍干，洗板 5 次。
顯色：TMB 底物各 50μL，避光 37℃反應(yīng) 14min。
終止檢測：終止液混勻，7min 內(nèi) 450nm 讀數(shù)，計(jì)算 IL-12 P40 含量。
關(guān)鍵字： 大鼠白介素12;IL-12/P40;ELISA試劑盒;
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