本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔包被大鼠FN特異性捕獲抗體。檢測(cè)時(shí)，樣本中的纖連蛋白抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合雜質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的FN檢測(cè)抗體，形成免疫夾心復(fù)合物。底物顯色后，顯色強(qiáng)度與樣本中FN濃度正相關(guān)，通過酶標(biāo)儀讀數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算，可精準(zhǔn)定量大鼠FN的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒
英文名稱：FN ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1662
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤0.6μg/mL
檢測(cè)范圍：1.2μg/mL - 60μg/mL
反應(yīng)時(shí)間：全程105分鐘，孵育55分鐘，顯色30分鐘
保存條件：2-8℃避光保存，大分子蛋白標(biāo)準(zhǔn)品低溫分裝
有效期：未開封12個(gè)月，開封后30天內(nèi)用完
特異性：特異性結(jié)合大鼠纖連蛋白，與膠原蛋白、層粘連蛋白無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤5%，板間CV≤7%
注意事項(xiàng)：粘稠樣本需稀釋預(yù)處理，避免堵孔；樣本避免劇烈震蕩，防止蛋白聚集變性。
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
酶標(biāo)板室溫放置 34min，梯度稀釋 FN 標(biāo)準(zhǔn)品，血漿 / 組織樣本稀釋上樣，空白孔加稀釋液，每孔 50μL。
每孔加入 FN 酶標(biāo)抗體 50μL，密封酶標(biāo)板，37℃孵育 78min。
洗板 5 次，每次浸泡 39s，反復(fù)沖洗去除非特異性結(jié)合物。
顯色 A、B 液各 50μL 加入震蕩混勻，避光顯色 24min。
快速加入終止液 50μL 終止底物反應(yīng)。
10min 內(nèi) 450nm 酶標(biāo)儀檢測(cè) OD 值。
標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算稀釋后濃度，還原原始樣本纖連蛋白含量。
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