本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)性ELISA檢測(cè)原理，用于定量檢測(cè)大鼠樣本中的鞘磷脂（SM）。酶標(biāo)板固相載體包被鞘磷脂特異性抗原，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，待測(cè)樣本與標(biāo)準(zhǔn)品中的SM抗原和固相包被抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合限量的酶標(biāo)記抗體，孵育洗板純化反應(yīng)體系后，加入顯色底物進(jìn)行顯色反應(yīng)。樣本中SM濃度越高，競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的酶標(biāo)抗體越少，顯色越淺，二者呈負(fù)相關(guān)，最終通過(guò)吸光度檢測(cè)與標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算，精準(zhǔn)測(cè)定大鼠鞘磷脂含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠鞘磷脂(SM)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 | 貨號(hào) | YS-R988 |
英文名稱(chēng) |
| 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)限值0.3μmol/L，可精準(zhǔn)檢測(cè)大鼠血清、組織中鞘磷脂含量。
檢測(cè)范圍：0.9μmol/L - 80μmol/L，適配大鼠脂代謝紊亂、神經(jīng)損傷、腫瘤脂質(zhì)代謝模型。
反應(yīng)時(shí)間：全流程反應(yīng)110分鐘，酶聯(lián)反應(yīng)充分，檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn)。
保存條件：2 - 8℃避光冷藏，脂質(zhì)檢測(cè)試劑易氧化，需嚴(yán)格密封存放。
有效期：原裝密封有效期8個(gè)月，開(kāi)封后1個(gè)月內(nèi)用完。
特異性：特異性識(shí)別大鼠鞘磷脂，與磷脂酰膽堿、甘油磷脂等脂質(zhì)無(wú)交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6.5%，板間CV≤8.5%，重復(fù)性穩(wěn)定。
注意事項(xiàng)：樣本避免脂血，高脂樣本需稀釋后檢測(cè)；全程避光、低溫操作，防止脂質(zhì)氧化降解；試劑混勻輕柔，避免起泡。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū)，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
1. 試劑盒全部試劑室溫平衡 33min，稀釋濃縮洗滌液；細(xì)胞膜提取樣本離心取上清備用。
2. 標(biāo)記酶標(biāo)板孔位，標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度 SM 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入待測(cè)上清 50μL，空白孔空置不加試劑。
3. 向檢測(cè)孔一次性加入酶標(biāo)記抗體工作液 100μL，封板密封避光。
4. 37℃恒溫避光孵育 75min，保證免疫反應(yīng)充分。
5. 棄凈孔內(nèi)液體，洗滌液浸泡微孔 38s，洗板 6 次，吸水紙徹底拍干。
6. 每孔添加顯色底物 A、B 各 50μL，混勻后 37℃避光顯色 21min。
7. 滴加終止液 50μL 終止顯色，酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定鞘磷脂濃度。
關(guān)鍵字： 大鼠鞘磷脂;SM;酶聯(lián)免疫分析試劑盒;
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