本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，用于大鼠熱休克蛋白20（HSP-20）的精準(zhǔn)定量。酶標(biāo)板微孔內(nèi)包被純化的HSP-20特異性捕獲抗體，加入待測(cè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品后，樣本中的HSP-20抗原與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗板后加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體，形成穩(wěn)定的免疫夾心復(fù)合物。經(jīng)底物顯色、反應(yīng)終止后，檢測(cè)所得吸光度值與樣本中HSP-20的含量呈正相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可準(zhǔn)確計(jì)算靶標(biāo)蛋白濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1347 |
英文名稱(chēng) | hSP-20 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)值0.15ng/mL，可精準(zhǔn)檢測(cè)大鼠組織、細(xì)胞中微量HSP-20表達(dá)。
檢測(cè)范圍：0.4ng/mL - 90ng/mL，適配大鼠應(yīng)激損傷、抗氧化、組織保護(hù)相關(guān)模型。
反應(yīng)時(shí)間：全流程90分鐘快速檢測(cè)，適合批量樣本篩查。
保存條件：2 - 8℃冷藏避光保存，蛋白抗體組分密封防潮，防止失活。
有效期：原裝試劑盒有效期8個(gè)月，恒定低溫保存穩(wěn)定。
特異性：特異性識(shí)別大鼠HSP-20蛋白，與其他小分子量熱休克蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6%，板間CV≤8%，重復(fù)性符合科研標(biāo)準(zhǔn)。
注意事項(xiàng)：細(xì)胞、組織樣本需充分裂解，提取完整蛋白；樣本避免高溫處理，防止熱休克蛋白變性；洗板徹底，減少非特異性結(jié)合。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū)，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
1. 試劑盒試劑室溫放置 34min，稀釋洗滌濃縮液；細(xì)胞裂解液樣本高速離心去除細(xì)胞碎片。
2. 標(biāo)記酶標(biāo)板各類(lèi)孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度 HSP-20 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入待測(cè)裂解上清 50μL，空白孔不加樣。
3. 向所有加樣孔加入酶標(biāo)記抗體液 100μL，封板嚴(yán)實(shí)密封避光。
4. 37℃恒溫避光孵育 78min，保證免疫結(jié)合完全。
5. 棄液洗板，每孔洗滌液浸泡 40s，重復(fù)洗板 6 次，微孔充分拍干。
6. 依次添加顯色 A、B 底物各 50μL，輕震混勻，37℃避光顯色 22min。
7. 加入終止液終止顯色反應(yīng)，450nm 測(cè)吸光度，標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 HSP-20 表達(dá)量。
關(guān)鍵字： 大鼠熱休克蛋白20;HSP-20;ELISA試劑盒;
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