本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA檢測原理，微孔板預(yù)先固定大鼠ANG-Ⅱ特異性捕獲抗體，加入待測樣本與標(biāo)準(zhǔn)品后，樣本中的ANG-Ⅱ抗原與固相抗體發(fā)生特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合雜質(zhì)后，加入酶標(biāo)記的ANG-Ⅱ檢測抗體，構(gòu)建固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體夾心結(jié)構(gòu)，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后，利用酶標(biāo)儀測定吸光度，吸光度數(shù)值與樣本中ANG-Ⅱ含量成正比，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線可定量檢測大鼠血管緊張素Ⅱ的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒
英文名稱：ANG-Ⅱ ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1671
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測靈敏度≤5pg/mL，可檢測大鼠微量ANG-Ⅱ表達(dá)，適配低濃度樣本檢測
檢測范圍：10pg/mL - 500pg/mL，覆蓋大鼠高血壓、心血管模型濃度變化區(qū)間
反應(yīng)時(shí)間：全流程反應(yīng)耗時(shí)90分鐘，標(biāo)準(zhǔn)化操作，反應(yīng)穩(wěn)定性強(qiáng)
保存條件：試劑盒2-8℃冷藏避光保存，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋后分裝低溫保存，避免反復(fù)凍融
有效期：未開封試劑盒有效期6個(gè)月，嚴(yán)格保存可保證檢測精度不變
特異性：特異性識(shí)別大鼠ANG-Ⅱ，與ANG-Ⅰ、ANG-Ⅲ無明顯交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均＜8%，數(shù)據(jù)重復(fù)性、一致性優(yōu)異
注意事項(xiàng)：樣本采集后快速離心分離，避免激素降解；顯色、終止步驟嚴(yán)格按時(shí)操作，把控實(shí)驗(yàn)時(shí)長。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：
1. 試劑平衡與稀釋
試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。
濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。
標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：
凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；
按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
待測樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。
2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備
設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。
耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。
取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。
3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記
酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫平衡 33min，拆分微孔板，規(guī)劃實(shí)驗(yàn)孔布局，粘貼標(biāo)識(shí)區(qū)分組別。
梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)準(zhǔn)孔加 50μL 標(biāo)品溶液，待測孔加入 50μL 大鼠抗凝血漿樣本，空白孔加稀釋液。
每孔添加酶結(jié)合液 100μL，密封后 37℃避光孵育 60min。
洗板 5 輪，每輪浸泡 30s，棄液拍干微孔。
顯色雙液各 50μL 依次加入，避光顯色 15min。
50μL 終止液加至每孔，混勻終止酶促反應(yīng)。
450nm 測 OD 值，計(jì)算樣本 ANG-Ⅱ 濃度。
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關(guān)鍵字： 大鼠血管緊張素Ⅱ;ANG-Ⅱ;ELISA試劑盒;
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