本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，微孔板固定大鼠HO-2特異性捕獲抗體，加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品及待測(cè)大鼠樣本后，樣本中的HO-2抗原與固相抗體發(fā)生特異性免疫結(jié)合，孵育結(jié)束后洗滌清除游離組分，加入酶標(biāo)記HO-2檢測(cè)抗體孵育結(jié)合，形成穩(wěn)定夾心免疫復(fù)合物，經(jīng)底物酶促顯色、終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度，吸光度與樣本中HO-2含量成正比，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒
英文名稱：HO-2 ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1317
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)靈敏度≤2.5pg/mL，精準(zhǔn)定量大鼠 constitutive型HO-2蛋白含量
檢測(cè)范圍：5pg/mL - 850pg/mL，適配大鼠基礎(chǔ)氧化代謝、組織穩(wěn)態(tài)檢測(cè)
反應(yīng)時(shí)間：全流程反應(yīng)耗時(shí)95分鐘，反應(yīng)體系穩(wěn)定，數(shù)據(jù)精準(zhǔn)
保存條件：試劑2-8℃避光冷藏，嚴(yán)禁冷凍，保證蛋白活性
有效期：原裝未開封試劑盒有效期6個(gè)月
特異性：專一性結(jié)合大鼠HO-2，不識(shí)別HO-1及其他氧化酶
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)≤7%，板間變異系數(shù)≤8%
注意事項(xiàng)：樣本無需高溫處理，全程低溫操作，維持蛋白天然結(jié)構(gòu)。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑室溫平衡 31min，拆分酶標(biāo)板并標(biāo)記各類實(shí)驗(yàn)微孔。
復(fù)溶凍干標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋，標(biāo)準(zhǔn)孔加 50μL 標(biāo)品，組織勻漿樣本孔加入 50μL 待測(cè)液，空白孔加稀釋液。
每孔加入酶偶聯(lián)檢測(cè)液 100μL，密封封板，37℃避光孵育 66min。
洗板 5 次，單次浸泡 30s，倒掉廢液后吸水紙吸干。
依次添加顯色 A、B 液各 50μL，避光 37℃顯色 13min。
50μL 終止液終止反應(yīng)，混勻微孔內(nèi)液體。
450nm 讀取吸光度，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線得出 HO-2 含量。
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關(guān)鍵字： 大鼠血紅素氧合酶2;HO-2;ELISA試劑盒;
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