本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA原理,酶標板預先包被大鼠Eotaxin 1/CCL11特異性抗體。檢測時,樣本與標準品中的趨化蛋白抗原與固相抗體特異性結(jié)合,洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后,加入酶標記的檢測抗體形成免疫復合物。經(jīng)TMB顯色、終止反應及吸光度檢測,結(jié)合標準曲線的線性關系,精準定量大鼠樣本中Eotaxin 1的含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1565 |
英文名稱 | Rat Eotaxin 1 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測濃度0.22pg/mL,超高靈敏度適配炎癥趨化因子檢測。
檢測范圍:0.6pg/mL - 140pg/mL,適配大鼠血清、氣道組織、炎癥細胞上清。
反應時間:總時長110分鐘,樣本溫育45分鐘、酶標二抗溫育40分鐘、顯色25分鐘。
保存條件:2-8℃避光保存,稀釋后試劑4℃可保存5天,禁止冷凍。
有效期:未開封有效期12個月,開封后1個月內(nèi)用完。
特異性:特異性結(jié)合大鼠CCL11/Eotaxin1,與其他趨化因子無交叉反應。
重復性:板內(nèi)CV≤8%,板間CV≤10%,炎癥因子檢測誤差可控。
注意事項:炎癥樣本需無菌處理,避免微生物污染;溫育過程嚴格避光。
試劑盒組成:
預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結(jié)合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標物,提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應,穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程:
試劑盒室溫靜置 33min,稀釋濃縮洗滌液,配制 Eotaxin1 標準品梯度稀釋體系,酶標板編號分類,大鼠支氣管肺泡灌洗液離心取上清待測。
標準品孔添加不同濃度 Eotaxin1 標準液 50μL,樣本孔加入灌洗液上清 50μL,空白孔補基礎稀釋液 50μL,每孔加入酶標記抗體液 100μL,封板封閉。
37℃避光孵育 67min,固相夾心結(jié)合靶趨化蛋白。
揭膜倒凈廢液,洗滌液浸泡每孔 34s,重復洗板 6 次,吸水紙徹底拍干板條。
每孔加注顯色 A、B 液各 50μL,混勻后 37℃避光顯色 19min。
逐孔滴加終止液 50μL 終止顯色反應,輕搖酶標板混勻。
450nm 讀取 OD 值,擬合標準曲線得到 Eotaxin1 檢測結(jié)果。
關鍵字: 大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1;Eotaxin 1/CCL11;ELISA試劑盒;
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