本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測大鼠樣本中AQP-1含量。預(yù)先將純化的大鼠AQP-1特異性抗體包被于酶標(biāo)板孔內(nèi)，形成固相抗體，加入待測樣本、標(biāo)準(zhǔn)品后，樣本中的AQP-1抗原會與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì)后，加入酶標(biāo)記的AQP-1二抗，形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體免疫復(fù)合物，再次洗滌后加入底物顯色液進(jìn)行顯色反應(yīng)，最終通過酶標(biāo)儀測定各孔吸光度值，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可精準(zhǔn)計(jì)算樣本中大鼠AQP-1的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測濃度可達(dá)0.15ng/mL，可精準(zhǔn)識別樣本中微量AQP-1蛋白，無假陰性檢測結(jié)果。

檢測范圍：0.3ng/mL - 12ng/mL，適配大鼠血清、組織勻漿、細(xì)胞上清液等常規(guī)樣本中AQP-1的含量檢測。

反應(yīng)時(shí)間：整體實(shí)驗(yàn)操作時(shí)長90分鐘，包含樣本孵育60分鐘、酶標(biāo)孵育20分鐘、顯色10分鐘。

保存條件：試劑盒未開封組分2-8℃冷藏保存，濃縮洗滌液室溫避光保存，嚴(yán)禁冷凍。

有效期：未開封妥善保存有效期6個(gè)月，開封后1個(gè)月內(nèi)用完，避免試劑失效。

特異性：僅特異性識別大鼠AQP-1蛋白，與大鼠AQP家族其他亞型及同源蛋白無交叉反應(yīng)。

重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)≤6%，板間變異系數(shù)≤8%，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好，數(shù)據(jù)波動小。

注意事項(xiàng)：樣本需避免反復(fù)凍融，實(shí)驗(yàn)全程使用無酶無污染耗材，顯色反應(yīng)需嚴(yán)格避光，終止后15分鐘內(nèi)完成讀值。
試劑盒組成：

預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物

標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)

生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)

辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化

終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果

濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)

封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

試劑盒室溫平衡 30min，配制洗滌液、標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋液、樣本稀釋液，取出包被酶標(biāo)板條，剩余板條密封 2-8℃避光保存。

設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔每孔依次加入不同濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入稀釋后待測樣本 50μL，空白孔不加任何液體。

所有孔內(nèi)直接加入酶結(jié)合工作液 100μL，封板膜密封酶標(biāo)板，37℃恒溫孵育 60min。

揭去封板膜，棄去孔內(nèi)全部液體，每孔加滿洗滌液靜置 30s 后拍干，重復(fù)洗板 5 次，孔內(nèi)無殘留液體與氣泡。

每孔依次加入顯色液 A 液 50μL、顯色液 B 液 50μL，輕柔震蕩混勻，37℃避光顯色 15min。

每孔立即加入終止液 50μL 終止顯色反應(yīng)，輕晃酶標(biāo)板混勻液體。

10min 內(nèi)使用酶標(biāo)儀在 450nm 波長處讀取各孔 OD 吸光度值，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度與 OD 值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本 AQP-1 實(shí)際濃度。