本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法原理，酶標(biāo)板固相包被大鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)特異性抗體，加入大鼠待測樣本后，樣本中的IGF-2抗原與包被抗體特異性結(jié)合，結(jié)合酶標(biāo)記二抗形成夾心免疫復(fù)合物，經(jīng)洗滌、顯色、終止反應(yīng)后，檢測吸光度并對照標(biāo)準(zhǔn)曲線，精準(zhǔn)定量樣本中IGF-2含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒
英文名稱：IGF-2 ELISA Kit
貨號：Y-E1655
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測濃度0.05ng/mL
檢測范圍：0.15ng/mL - 31ng/mL
反應(yīng)時間：總反應(yīng)時長100分鐘
保存條件：2-8℃低溫避光保存，試劑密封防潮
有效期：未開封完好保存6個月
特異性：專一識別大鼠IGF-2，與IGF-1無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)≤4.4%，板間變異系數(shù)≤6.4%
注意事項：孵育溫度恒定37℃，溫度波動會影響抗原抗體結(jié)合效率
通用注意事項：
樣本要求
血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。
溫度控制
孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。
避光操作
TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。
洗板規(guī)范
洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。
污染防控
實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。
安全防護
終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。
失效判定
試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。
稀釋校正
樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。
空白對照
空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。
儲存禁忌
試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：
試劑盒室溫靜置 28min，稀釋洗滌緩沖液，逐級稀釋 IGF-2 標(biāo)準(zhǔn)品，大鼠血清樣本離心去除雜質(zhì)。
酶標(biāo)板劃分孔位，空白孔加稀釋液，標(biāo)準(zhǔn)孔加梯度標(biāo)品，樣本孔加待測樣本，每孔加入酶偶聯(lián)試劑，封板密封。
37℃避光孵育 60min，溫度穩(wěn)定無波動。
棄除孔內(nèi)液體，洗滌液浸泡微孔 28s，甩干，洗板 4 次，拍干微孔內(nèi)水分。
添加顯色 A、B 液，輕微震蕩混勻，37℃避光顯色 14min。
滴加終止液終止顯色反應(yīng)，混勻微孔溶液。
450nm 測吸光度，換算樣本 IGF-2 濃度。
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關(guān)鍵字： 大鼠胰島素樣生長因子2;IGF-2;ELISA試劑盒;
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