本試劑盒運(yùn)用經(jīng)典雙抗體夾心ELISA原理，在酶標(biāo)板微孔內(nèi)包被大鼠胰淀素特異性捕獲抗體，加入標(biāo)準(zhǔn)品與大鼠待測(cè)樣本后，樣本中的Amylin抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗板除去未結(jié)合雜質(zhì)，再加入酶標(biāo)記的胰淀素檢測(cè)抗體，形成夾心式免疫復(fù)合物，經(jīng)底物催化顯色后，反應(yīng)體系的吸光度值與樣本中胰淀素的含量呈線性正相關(guān)，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可精準(zhǔn)計(jì)算出待測(cè)樣本中Amylin的濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒
英文名稱：Rat Amylin ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1276
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度0.08ng/mL
檢測(cè)范圍：0.2ng/mL - 8ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：全程120分鐘（樣本孵育60min，酶標(biāo)孵育30min，顯色30min）
保存條件：試劑盒2-8℃冷藏，濃縮洗滌液室溫避光保存
有效期：未開封儲(chǔ)存有效期12個(gè)月
特異性：專一結(jié)合大鼠胰淀素，與胰島素、胰高血糖素、GLP-1無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)CV≤5%，板間變異系數(shù)CV≤6%
注意事項(xiàng)：血漿樣本需添加抗凝劑，避免凝血影響檢測(cè)；試劑使用前需平衡至室溫，混勻無沉淀；洗滌時(shí)避免孔內(nèi)液體殘留
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫回溫 28min，稀釋濃縮洗滌液，逐級(jí)稀釋 Amylin 標(biāo)準(zhǔn)品，酶標(biāo)板做好孔位標(biāo)記區(qū)分組別。
標(biāo)準(zhǔn)孔添加對(duì)應(yīng)濃度胰淀素標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入 50μL 大鼠上清待測(cè)液，空白孔不加試劑。
所有檢測(cè)孔加入一步法酶結(jié)合物工作液 100μL，密封封板，37℃孵育 55min。
棄液洗板，每孔洗滌液浸潤(rùn) 35s 后甩干，重復(fù)洗板 4 次，吸干孔內(nèi)殘留液體。
每孔加入顯色液 A、B 各 50μL，避光條件下 37℃顯色 14min。
每孔加入終止液 50μL 終止顯色，混勻板面液體。
酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定 OD 值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本胰淀素 Amylin 濃度。
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關(guān)鍵字： 大鼠胰淀素;Amylin;ELISA試劑盒;
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