本試劑盒依托競爭性ELISA檢測原理，針對大鼠VA建立特異性免疫反應(yīng)體系。酶標(biāo)板預(yù)先包被VA特異性抗原，檢測時(shí)樣本中的VA與固相抗原競爭結(jié)合限量的抗VA抗體，結(jié)合的抗體可與后續(xù)加入的酶標(biāo)記物反應(yīng)，未結(jié)合的游離物質(zhì)經(jīng)洗滌去除。加入底物顯色后，樣本中VA含量越高，競爭性抑制作用越強(qiáng)，顯色深度越弱，吸光度值越低，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線比對，可定量測定大鼠樣本中維生素A的濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠維生素A(VA)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1473 |
英文名稱 | VA ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度≤0.02μmol/L
檢測范圍：0.05μmol/L - 2.5μmol/L
反應(yīng)時(shí)間：全程80分鐘，孵育50分鐘，顯色15分鐘，終止讀數(shù)15分鐘
保存條件：試劑2-8℃避光保存，維生素A標(biāo)準(zhǔn)品-20℃避光凍存
有效期：原裝有效期12個(gè)月，標(biāo)準(zhǔn)品解凍后7天內(nèi)使用
特異性：特異性識別大鼠血清中視黃醇（維生素A），與胡蘿卜素、維生素A衍生物交叉反應(yīng)極低
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤5%，板間CV≤7%
注意事項(xiàng)：全程嚴(yán)格避光操作，維生素A見光易分解；樣本需空腹采集，飲食會影響檢測數(shù)值；避免脂血樣本，脂質(zhì)會干擾顯色反應(yīng)。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
微孔板室溫回溫，標(biāo)準(zhǔn)品倍比稀釋，待測樣本預(yù)處理稀釋，空白孔添加樣本稀釋液，每孔上樣 50μL。
每孔加入 VA 酶結(jié)合試劑 50μL，密封酶標(biāo)板，37℃避光孵育 65min。
洗板 5 次，每次洗液浸潤 30s，倒扣拍干所有孔內(nèi)液體。
每孔加入底物顯色液 100μL，室溫避光顯色 16min。
加入終止液 50μL 終止顯色反應(yīng)。
酶標(biāo)儀 450nm 測定吸光度值并記錄數(shù)據(jù)。
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本稀釋后濃度，還原原始樣本 VA 濃度。
關(guān)鍵字： 大鼠維生素A;VA;ELISA試劑盒;
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