本試劑盒采用經(jīng)典雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，微孔板預(yù)先固定抗人Plg特異性抗體，加入不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品及待測(cè)樣本，樣本中的Plg抗原可與固相抗體發(fā)生特異性免疫結(jié)合，孵育結(jié)束后洗滌去除孔內(nèi)未結(jié)合物質(zhì)，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Plg配對(duì)抗體，形成穩(wěn)定免疫夾心復(fù)合物，底物催化顯色后終止反應(yīng)，檢測(cè)各孔吸光度，OD值與Plg含量呈正相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線可定量分析樣本中Plg的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E2831 |
英文名稱(chēng) | Plg ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：0.09ng/mL
檢測(cè)范圍：0.15-9.6ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：37℃孵育 65min，二抗 40min，避光顯色 14min
保存條件：試劑盒 2-8℃，開(kāi)蓋試劑 1 個(gè)月內(nèi)用完，過(guò)期棄用
顯色系統(tǒng)：預(yù)混型即用 TMB 顯色液
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm+630nm 雙波長(zhǎng)校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：直接坐標(biāo)線性擬合，舍棄極值點(diǎn)保證曲線相關(guān)性
注意事項(xiàng)：溶血樣本中血紅蛋白會(huì)干擾顯色結(jié)果，重度溶血樣本直接舍棄檢測(cè)
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見(jiàn)光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無(wú)酶、無(wú)熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過(guò)久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫靜置 30min 回溫，配制一步法抗原酶結(jié)合液，標(biāo)記微孔板孔位。
每孔預(yù)加酶結(jié)合液 55μL，標(biāo)品孔加梯度 Plg 標(biāo)準(zhǔn)品 45μL，樣品孔加預(yù)處理樣本 45μL，空白孔加稀釋液 45μL。
封板 37℃孵育 62min，傾倒廢液，洗板 5 次，每次浸泡 30s，充分拍干微孔板。
每孔加入 TMB 顯色液 100μL，震蕩混勻。
避光 37℃顯色 17min，觀察顏色梯度。
滴加終止液 50μL 終止顯色。
450nm 測(cè)定 OD 值，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 Plg。
關(guān)鍵字： 人纖溶酶原;Plg;ELISA試劑盒;
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