本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA技術(shù)原理，酶標板微孔包被純化的人脂肪分化相關(guān)蛋白特異性捕獲抗體，待測樣本與標準品中的ADRP抗原可與固相抗體特異性結(jié)合，洗板去除未結(jié)合成分后，加入酶標記ADRP檢測抗體形成免疫復(fù)合物，TMB底物顯色后終止反應(yīng)，檢測吸光度并對照標準曲線，即可定量測定樣本中ADRP蛋白的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒
英文名稱：ADRP Elisa Kit
貨號：Y-E809
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最小檢測 0.21ng/mL
檢測范圍：0.42ng/mL - 26.8ng/mL
反應(yīng)時間：一抗孵育 38min，二抗 38min，顯色 16min
保存條件：2～8℃冷藏，微孔板開封后密封防潮
顯色系統(tǒng)：TMB 雙液配比顯色
檢測波長：450nm 單波長讀數(shù)
標準曲線繪制：線性回歸擬合曲線，適用于細胞分化樣本批量篩查
注意事項：脂肪組織勻漿需脫脂處理，油脂會包裹微孔板阻礙抗原結(jié)合
關(guān)鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴禁高溫暴曬。
實驗步驟如下：
試劑盒室溫平衡 28min，梯度稀釋 ADRP 標準品，脂肪組織勻漿上清稀釋制備待測液，標記酶標板各孔信息。
向空白、標準、樣本孔依次加入對應(yīng)稀釋液、標準品、待測勻漿樣本，規(guī)范加樣操作。
直接向全部微孔加入酶聯(lián)抗體工作液，手動搖晃酶標板混勻反應(yīng)液體。
封板膜封閉酶標板，37℃恒溫避光孵育 62min，單層平放孵育。
倒掉孔內(nèi)液體，洗板液浸泡每孔 32s，連續(xù)洗板 4 次并拍干微孔。
避光滴加 TMB 顯色液，37℃避光顯色 14min，觀察梯度色差。
終止液終止顯色，酶標儀 450nm 檢測吸光值，換算 ADRP 蛋白濃度。
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關(guān)鍵字： 人脂肪分化相關(guān)蛋白;ADRP;ELISA試劑盒;
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