本試劑盒采用間接ELISA檢測(cè)原理,微孔板固相包被人血管緊張素Ⅰ受體抗原,加入待測(cè)樣本與標(biāo)準(zhǔn)品后,樣本中的ANG-ⅠR抗體與固相抗原特異性結(jié)合,孵育洗滌去除游離雜質(zhì),加入HRP標(biāo)記的抗人IgG抗體進(jìn)行結(jié)合反應(yīng),底物顯色、終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量檢測(cè)樣本中ANG-ⅠR抗體的含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E396 |
英文名稱 | ANG-ⅠR antibody Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:陰性對(duì)照均值 + 2SD 為臨界判定值
檢測(cè)范圍:血清樣本定性陰陽(yáng)性判定,無(wú)固定濃度區(qū)間
反應(yīng)時(shí)間:樣本孵育 118min,酶二抗 74min,顯色 22min
保存條件:2~8℃避光,受體包被板不可磕碰損傷包被層
顯色系統(tǒng):TMB 底物顯色,硫酸終止
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm,630nm 參比
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:定性檢測(cè),設(shè)置陰陽(yáng)性對(duì)照孔,計(jì)算 Cutoff 值判讀結(jié)果,不繪制定量曲線
注意事項(xiàng):自身免疫性腎病樣本易出現(xiàn)該抗體陽(yáng)性,需搭配臨床指標(biāo)解讀
關(guān)鍵注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書,不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光,避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
試劑盒室溫平衡 30min,稀釋一步法酶標(biāo)記抗原液,排布對(duì)照孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、血清樣本孔。
所有孔預(yù)先加入酶液 50μL,標(biāo)準(zhǔn) / 對(duì)照孔添加對(duì)應(yīng)試劑 50μL,待測(cè)孔加稀釋血清 50μL,空白孔加稀釋緩沖液。
封板 37℃孵育 60min,棄液洗板 5 次,每次浸泡 30s,拍干微孔板。
分別添加顯色 A 液、B 液各 50μL,震蕩混勻。
避光 37℃顯色 14min。
加入終止液 50μL 終止顯色。
450nm 讀取 OD 值,判讀 ANG-ⅠR 抗體滴度。
關(guān)鍵字: 人血管緊張素Ⅰ受體抗體;ANG-ⅠR;ELISA試劑盒;
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