本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔固定人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶特異性抗體，加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本后，樣本中的TACE抗原與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入酶標(biāo)記TACE檢測(cè)抗體，形成完整的免疫復(fù)合物，經(jīng)顯色反應(yīng)后檢測(cè)OD值，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系，精準(zhǔn)定量樣本中TACE蛋白的表達(dá)水平。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)ELISA試劑盒
英文名稱：TACE Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E3034
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最小檢測(cè) 0.19pg/mL
檢測(cè)范圍：0.38pg/mL - 24.32pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：孵育 54min、44min，避光顯色 14min
保存條件：2～8℃冷藏，開封后板條密封加干燥劑
顯色系統(tǒng)：HRP 介導(dǎo) TMB 雙液顯色
檢測(cè)波長：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：去除背景本底后非線性擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項(xiàng)：細(xì)胞裂解液需加入蛋白酶抑制劑，防止 TACE 蛋白被降解
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑室溫平衡 28min，倍比稀釋 TACE 標(biāo)準(zhǔn)品，組織勻漿上清稀釋預(yù)處理，標(biāo)記酶標(biāo)板微孔類別。
向空白、標(biāo)準(zhǔn)、樣本孔分別加入稀釋液、梯度標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)勻漿樣本，防止加樣交叉污染。
一步法直接添加酶聯(lián)特異性抗體工作液至所有反應(yīng)孔，手動(dòng)搖晃混勻體系。
封板密封，37℃濕盒避光孵育 63min，保證孵育環(huán)境濕度充足。
去除封板傾倒液體，洗板液浸泡每孔 29s，重復(fù)洗板 4 次并拍干微孔。
避光加入顯色 AB 底物液，室溫避光顯色 17min，把控顯色時(shí)長避免過深。
終止液終止顯色，450nm 讀取吸光值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 TACE 濃度。
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關(guān)鍵字： 人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶;TACE;ELISA試劑盒;
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