本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，酶標(biāo)板微孔包被純化的人CDK5特異性抗體，待測(cè)樣本與梯度標(biāo)準(zhǔn)品中的周期素依賴性激酶5可與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體構(gòu)建免疫復(fù)合物，經(jīng)TMB底物顯色、終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合精準(zhǔn)定量樣本中CDK5蛋白含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒
英文名稱：CDK5 Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E940
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最小可測(cè) 0.18ng/mL
檢測(cè)范圍：0.36ng/mL - 23.04ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：一抗 43min，二抗 43min，顯色 14min
保存條件：整套試劑 2～8℃，禁止靠近熱源與光照
顯色系統(tǒng)：TMB 雙液顯色體系
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm 參比 620nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：雙孔均值計(jì)算，線性回歸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項(xiàng)：腦組織樣本勻漿后低速離心去除髓鞘碎片，防止非特異性吸附
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū)，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑室溫放置 33min，稀釋配制 CDK5 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋液，神經(jīng)細(xì)胞裂解上清稀釋預(yù)處理，標(biāo)記酶標(biāo)板微孔組別。
規(guī)范加樣操作，空白孔加稀釋液，標(biāo)準(zhǔn)品孔依次加入梯度 CDK5 標(biāo)準(zhǔn)品，樣本孔加入待測(cè)裂解上清。
直接向全部微孔加入酶聯(lián)抗體工作液，低速震蕩酶標(biāo)板 12s 混勻反應(yīng)體系。
封板密封后 37℃避光孵育 70min，酶標(biāo)板平放無(wú)堆疊受壓。
棄除孔內(nèi)廢液，洗板液洗板 5 次，每次浸泡 35s，倒扣酶板拍干微孔殘留洗液。
避光加入顯色底物，37℃避光顯色 18min，顯色完全后加入終止液。
酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定吸光值，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本 CDK5 激酶濃度。
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關(guān)鍵字： 人周期素依賴性激酶5;CDK5;ELISA試劑盒;
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