本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，酶標板微孔包被人MHCⅢ類分子特異性捕獲抗體，待測樣本與標準品中的主要組織相容性復合體Ⅲ類抗原可與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入酶標記檢測抗體形成穩(wěn)定免疫復合物，經(jīng)TMB底物顯色、終止反應(yīng)后檢測吸光度，依據(jù)標準曲線精準定量樣本中MHCⅢ的表達水平。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒
英文名稱：MHCⅢ/HLA-Ⅲ ELISA Kit
貨號：Y-E2874
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢出 0.27ng/mL
檢測范圍：0.54ng/mL - 34.56ng/mL
反應(yīng)時間：總流程 96min，溫育 42min、34min，顯色 20min
保存條件：未拆封 2～8℃密封存放，防止試劑揮發(fā)
顯色系統(tǒng)：TMB 雙液配比顯色體系
檢測波長：450nm 單波長讀數(shù)
標準曲線繪制：復孔剔除極值后繪制標準曲線計算濃度
注意事項：補體類樣本避免反復凍融，補體蛋白易失活裂解
關(guān)鍵注意事項：
實驗前需仔細閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下：
試劑盒室溫靜置 30min，梯度稀釋 MHCⅢ 標準品，血清樣本無菌稀釋預(yù)處理，對酶標板分組標記孔位。
無菌槍頭逐孔加樣，空白孔添加無菌稀釋緩沖液，標準孔加梯度 MHCⅢ 標準品，樣本孔加入稀釋血清樣本。
直接向全部微孔加入酶標記特異性抗體工作液，低速震蕩混勻 10s。
無菌封板膜密封酶標板，37℃避光孵育 68min，避光防止抗體失活。
傾倒廢液，無菌洗板液洗板 5 次，每次浸泡 32s，吸水紙吸干微孔殘留洗滌液。
避光滴加顯色底物混合液，37℃避光顯色 16min，把控顯色時長避免過度氧化。
終止液終止反應(yīng)，酶標儀 450nm 讀取吸光值，計算 MHCⅢ 含量。
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關(guān)鍵字： 人主要組織相容性復合體Ⅲ類;MHCⅢ/HLA-Ⅲ;ELISA試劑盒;
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