本試劑盒采用競爭法ELISA檢測原理，微孔板預先包被異丙腎上腺素固相抗原，加入待測樣本、標準品和酶標記特異性抗體，樣本中的iso-Hyd與固相抗原競爭結(jié)合酶標抗體，孵育完成免疫反應(yīng)后洗滌去除游離物質(zhì)，加入顯色底物進行酶促顯色，終止反應(yīng)后檢測吸光度，吸光度與樣本中iso-Hyd濃度呈負相關(guān)，通過標準曲線反向定量檢測其含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低可測 0.03ng/mL

檢測范圍：0.1~6.4ng/mL

反應(yīng)時間：競爭法孵育 85min，二抗 40min，顯色 17min，總 142min

保存條件：試劑盒 2~8℃，小分子標準品分裝凍存減少降解

顯色系統(tǒng)：A+B 混合 TMB 顯色體系

檢測波長：450nm 主波長讀數(shù)

標準曲線繪制：競爭抑制法六參數(shù)擬合標準曲線

注意事項：樣本采集全程避光，兒茶酚胺類物質(zhì)極易光照氧化
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設(shè)置雙復孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

血漿樣本稀釋預處理：抗凝血漿稀釋配比渦旋混勻，室溫靜置 9min；試劑室溫復溫 28min。

一步加樣孵育：微孔加入標準品、待測血漿與酶工作液，封板 37℃孵育 63min。

微孔洗滌：棄液洗滌浸泡 35s，洗板 5 次，拍干微孔內(nèi)液體。

底物顯色：加入顯色 A、B 液避光混勻，37℃顯色 15min。

終止反應(yīng)：加入終止液輕晃酶標板混勻。

光度檢測：450nm 波長讀取 OD 值存檔數(shù)據(jù)。

血藥濃度計算：標準曲線換算稀釋倍數(shù)得到異丙腎上腺素血漿濃度。