本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測原理，將小鼠β甘露糖苷酶（β Manase）特異性抗體包被于酶標(biāo)板微孔表面。檢測體系中，樣本、標(biāo)準品中的β Manase抗原與固相捕獲抗體特異性結(jié)合，洗滌去除非特異性結(jié)合雜質(zhì)后，加入HRP標(biāo)記的檢測抗體，形成完整的免疫復(fù)合物。經(jīng)洗滌純化后加入TMB底物發(fā)生酶促顯色反應(yīng)，顯色強度與樣本中β Manase含量正相關(guān)，終止反應(yīng)后檢測吸光度值，對照標(biāo)準曲線即可完成定量檢測。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA試劑盒
英文名稱：β Manase ELISA Kit
貨號：Y-E2269
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢出 0.13U/L
檢測范圍：0.3U/L～50U/L
反應(yīng)時間：37℃溫育樣本 92min，二抗 52min，避光顯色 21min，終止讀板，總時長 165min
保存條件：試劑盒全程 2～8℃避光；洗滌濃縮液可常溫長期存放
顯色系統(tǒng)：預(yù)制單組分 TMB 顯色液
檢測波長：450nm+620nm 雙波長
標(biāo)準曲線繪制：半對數(shù)坐標(biāo)繪制標(biāo)準曲線，根據(jù) OD 值反向換算樣本酶活力
注意事項：組織勻漿需充分離心去除沉淀；底物添加順序不可顛倒。
關(guān)鍵注意事項：
實驗前需仔細閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下：
試劑盒室溫平衡 24min，稀釋洗滌工作液，梯度制備 β 甘露糖苷酶標(biāo)準品。
酶標(biāo)板分孔加樣標(biāo)準品、待測樣本與空白對照，做好位置記錄。
直接加入酶標(biāo)記檢測液，覆膜封板，37℃孵育 55min。
洗板 4 次，每次浸泡 33s，拍干孔內(nèi)廢液。
避光顯色底物反應(yīng) 14min。
加入終止液終止顯色，輕振酶標(biāo)板。
讀取 OD 值，依據(jù)標(biāo)準曲線計算目標(biāo)蛋白含量。
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關(guān)鍵字： 小鼠β甘露糖苷酶;β Manase;ELISA試劑盒;
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