本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA技術(shù)原理，微孔板預(yù)先包被人IDO特異性抗體，加入標(biāo)準(zhǔn)品與待測組織、細(xì)胞上清樣本，樣本中的IDO抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合雜蛋白，加入酶標(biāo)記IDO檢測抗體形成免疫復(fù)合物，充分洗滌后顯色、終止反應(yīng)，檢測吸光度并結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量測定樣本中IDO的表達(dá)含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E952 |
英文名稱 | IDO Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最小檢出 0.06ng/mL
檢測范圍：0.2~12.8ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育 75min，酶標(biāo)抗體 45min，顯色 15min，合計(jì) 135min
保存條件：2~8℃儲(chǔ)存，底物液必須遮光存放
顯色系統(tǒng)：避光穩(wěn)定型 TMB 顯色底物
檢測波長：450nm 讀數(shù)，630nm 扣除孔間本底
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：八點(diǎn)梯度稀釋，線性回歸構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項(xiàng)：炎癥誘導(dǎo) IDO 表達(dá)升高，需結(jié)合炎癥指標(biāo)聯(lián)合判讀結(jié)果
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
細(xì)胞上清 / 組織勻漿稀釋：樣本稀釋液稀釋上清混勻，室溫靜置 12min；試劑盒整套試劑室溫平衡 32min。
微孔加樣封板孵育：設(shè)置空白、標(biāo)準(zhǔn)、樣本孔，加入對應(yīng)液體與酶結(jié)合試劑，密封酶標(biāo)板 37℃孵育 71min。
洗板除雜：洗滌液浸泡微孔 45s，洗板 5 次，徹底拍干微孔廢液。
底物顯色：加入顯色 A、B 液避光混勻，37℃顯色 18min。
終止液終止：準(zhǔn)時(shí)加入終止液輕搖酶標(biāo)板混勻。
光度檢測：450nm 波長讀取 OD 吸光度并歸檔。
蛋白定量：標(biāo)準(zhǔn)曲線帶入樣本 OD 值，換算稀釋倍數(shù)得出 IDO 濃度。
關(guān)鍵字： 人吲哚胺2,3-雙加氧酶;IDO;ELISA試劑盒;
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